Western blot คืออะไร?

Western blot เป็นเทคนิคการวิเคราะห์ในห้องปฏิบัติการซึ่งใช้ในการแยกโปรตีนมันสามารถใช้ในการวินิจฉัยโรคบางชนิดและในการวิจัยเกี่ยวกับโปรตีนและกระบวนการต่างๆที่มีชื่อเสียง Western blot เชื่อมโยงกับการวินิจฉัยการติดเชื้อเอชไอวี แต่ยังสามารถใช้เพื่อค้นหาร่องรอยของโรคไข้สมองอักเสบจากโบฟฟีฟอร์ม (BSE) และโรค Lymeตัวอย่างที่ส่งออกสำหรับการทดสอบด้วยโปรโตคอล Western blot สามารถส่งคืนผลลัพธ์ในไม่กี่วันถึงหลายสัปดาห์ขึ้นอยู่กับความสามารถในห้องปฏิบัติการและความเร่งด่วน

ใน blot ตะวันตกตัวอย่างซึ่งอาจมาจากเลือดหรือเนื้อเยื่อเป็นอันดับแรกใส่อิเล็กโทรโฟเรซิสเพื่อให้โปรตีนจะแยกออกตามความยาวแถบของเจลอิเล็กโทรโฟเรซิสที่มีโปรตีนที่แยกได้ของความยาวเป้าหมายสามารถใช้ในการถ่ายโอนโปรตีนไปยังสารตั้งต้น nitrocellulose สำหรับขั้นตอนต่อไปของการทดสอบในระหว่างขั้นตอนนี้แอนติบอดีจะถูกนำไปใช้กับตัวอย่างโดยมีเป้าหมายในการติดแท็กโปรตีนด้วยแอนติเจนซึ่งแอนติบอดีล็อคไปที่

เมื่อโปรตีนถูกแท็กพวกเขาสามารถระบุได้ง่ายในกรณีของการทดสอบโรคการปรากฏตัวของโปรตีนปฏิกิริยาบ่งชี้ว่าตัวอย่างได้ทดสอบในเชิงบวกWestern blots ไม่ค่อยกลับมาเป็นเท็จแม้ว่ามันจะเกิดขึ้นได้ในบางโอกาสและพวกเขาอาจกลับมาเป็นลบที่ผิดพลาดซึ่งบุคคลมีโรคจริง ๆ แต่มันไม่ได้แสดงในการทดสอบแบบตะวันตกสิ่งนี้อาจเป็นเรื่องธรรมดาโดยเฉพาะอย่างยิ่งในกรณีที่ตัวแทนที่ก่อให้เกิดโรคยังไม่ได้เริ่มทำซ้ำ

นักวิจัยสามารถใช้ผลลัพธ์เพื่อระบุโปรตีนเฉพาะที่พวกเขากำลังติดตามและเพื่อวัตถุประสงค์อื่น ๆ ที่หลากหลายการทำความเข้าใจว่าฟังก์ชั่นโปรโตคอล Western Blot เป็นทักษะที่สำคัญสำหรับนักวิจัยและช่างเทคนิคในห้องปฏิบัติการอย่างไรเนื่องจากพวกเขาจะต้องสามารถส่งคืนผลลัพธ์ที่เชื่อถือได้และเชื่อถือได้โดยใช้วิธีนี้ทักษะห้องปฏิบัติการรวมถึงการเรียนรู้วิธีจัดการตัวอย่างที่ซับซ้อนหรือไม่ดีและวิธีการหลีกเลี่ยงการปนเปื้อนในระหว่างกระบวนการเพื่อให้ผลลัพธ์ของการทดสอบเป็นที่รู้จักกันว่าเป็นจริง

เทคนิคนี้บางครั้งเรียกว่าอิมมูโนลอตเพราะโปรตีนที่ต้องการเป็นหลัก“ blotted” ด้วยแอนติบอดีเพื่อให้พวกเขาจะปรากฏขึ้นการทดสอบนี้สามารถใช้เพื่อค้นหาโปรตีนในสัตว์ทุกชนิดไม่ใช่แค่มนุษย์โดยมีสัตวแพทย์มักใช้การทดสอบ Western blot เพื่อตรวจสอบว่าฝูงวัวติดเชื้อหรือสัมผัสกับ BSE หรือไม่