İki farklı amaç için bir antibiyogram testi kullanılabilir. Kirby-Bauer yöntemi, bir bakteri suşunun çeşitli antibiyotiklere karşı duyarlılığını test etmek için kullanılır. Antibiyogramlar ayrıca seyreltme yöntemini kullanarak minimal inhibitör konsantrasyonunu (MIC) veya bakteri suşunun büyümesini inhibe edecek en küçük antibiyotik konsantrasyonunu belirleyebilir.
Kirby-Bauer yöntemi, belirli bir bakteri suşuna karşı kullanılacak en iyi antibiyotiği belirlemek için kullanılan bir antibiyogramdır. Testler, sığ, yuvarlak, agar besiyerleri ile doldurulmuş, bakteri üremesini teşvik etmek için besinler ile doldurulmuş jel benzeri bir madde ile doldurulmuş olan petri kabında gerçekleştirilir. Test edilecek bakteri suşu, plak yüzeyine eşit şekilde yayılır. Her biri farklı bir antibiyotiğe aşılanmış birkaç dairesel kağıt disk, plakanın yüzeyine eşit aralıklarla yerleştirilmiş ve bakterilerle temas kurmak için hafifçe agarın içine itilmiştir. Plakalar daha sonra bir inkübatörde gece boyunca büyümesine izin verilir.
Gece boyunca inkübasyonun ardından, her bir kağıt diski çevreleyen bakteri üremesi olmayan dairesel bir alan olacaktır. Bu alana inhibisyon bölgesi denir. Her disk için inhibisyon bölgesinin çapı ölçülür ve test edilen bakteri suşunun farklı antibiyotiklerin her birine dirençli, orta veya duyarlı olup olmadığını belirlemek için bir kontrol çizelgesiyle karşılaştırılır. Büyük bir inhibisyon bölgesi, bakteri suşunun test diskindeki antibiyotiğe duyarlı olduğu anlamına gelir.
Seyreltme yöntemi, bir bakteri suşuna karşı kullanılacak en etkili antibiyotik konsantrasyonunu belirlemek için kullanılan bir antibiyogramdır. Gece boyunca yeni bir test bakteri partisinin kültürlenmesi veya büyütülmesi ve ardından yeni kültürlerin saflık açısından kontrol edilmesi veya kültürün saflaştırılması ile başlar. İki kontrol veya karşılaştırma bakteri de hazırlanır. Bakteriyel suşun konsantrasyonu, bir spektrofotometre kullanılarak belirlenir ve konsantrasyon, seyreltme metodu için uygun bir aralığa ayarlanır.
Test edilecek antibiyotiklerin seri seyreltilmesi, farklı şişelerde konsantrasyonda artan ve dereceli değişiklikler yapılarak hazırlanır. Değişen antibiyotik konsantrasyonlarının bir serisi, eşit miktarda test bakteri suşu ile aşılanır, diğer seri ise kontrol bakteri suşları ile aşılanır. Tüm aşılanmış antibiyotik konsantrasyonlarının bir inkübatörde veya bazı flakonlarda gözle görülür bakteriyel büyüme gözlenene kadar gece boyunca büyümesine izin verilir. MİK, görünür bir bakteri üremesi gözlenmeyen antibiyotik konsantrasyonudur. Bir MIC değeri, bakteri suşlarının değişen direncini değerlendirmek için kontrollü bir yoldur ve enfeksiyonlar için antibiyotik tedavisine sınır koyar.
