Apa itu produksi protein rekombinan?

Produksi protein rekombinan adalah ekspresi protein yang telah diproduksi oleh teknik DNA rekombinan.Proses ini memungkinkan zat -zat ini dibuat dalam jumlah besar.Produksi massal seperti itu dilakukan baik untuk studi laboratorium dan untuk produksi industri.

Teknik ini sering digunakan untuk menghasilkan hormon pertumbuhan manusia dan insulin.Memperoleh hormon pertumbuhan manusia melalui produksi protein rekombinan adalah peningkatan besar dibandingkan mendapatkannya dari mayat karena adanya protein yang diperoleh dari mayat kadang -kadang mengakibatkan penularan penyakit.Membuat insulin dengan cara ini juga bermanfaat karena telah memungkinkan varian insulin yang dibuat yang memiliki aksi farmakologis yang berbeda dalam tubuh.

Protein adalah rantai asam amino, yang dikodekan oleh DNA.Gen yang kode untuk protein ini dimasukkan ke dalam vektor khusus, atau unit DNA.Vektor dipilih yang akan menghasilkan sejumlah besar protein yang diinginkan.Ini dikenal sebagai overexpression .

Ekspresi berlebih dilakukan dalam sel inang khusus.Terkadang inangnya adalah bakteri atau ragi.Dalam kasus di mana protein berasal dari mamalia, inang sering merupakan garis sel serangga atau mamalia.Sejumlah besar kit tersedia secara komersial untuk memfasilitasi kedua kloning gen, dan produksi protein rekombinan berikutnya.

Kit ini memiliki vektor khusus yang disebut vektor ekspresi yang memiliki promotor khusus untuk menghasilkan protein dalam jumlah besar.Promotor adalah bagian dari DNA yang mendorong produksi urutan gen yang mengikutinya.Seringkali, vektor ekspresi ini dapat dimatikan dan diinduksi.Terutama dengan inang bakteri, menghasilkan terlalu banyak protein sekaligus dapat beracun, menghambat pertumbuhan bakteri.

Ada beberapa cara berbeda untuk menginduksi ekspresi.Dalam keduanya, bakteri ditanam hingga kepadatan tertentu.Maka salah satu senyawa ditambahkan untuk induksi, atau suhu digeser ke yang promotor aktif.

untuk memfasilitasi pemurnian protein dari bakteri, kloning sering dilakukan sehingga ada label pada protein yangakan berikatan dengan matriks.Ini memisahkan protein dari puing -puing seluler.Misalnya, tag molekul histidin pada protein akan mengikat ke kolom nikel.Setelah protein terikat, tag dibelah, meninggalkan protein murni yang kemudian dapat dielusi dari kolom.Diperlukan waktu bertahun -tahun untuk memurnikan protein menggunakan metode tradisional.

Faktor tambahan yang perlu dipertimbangkan adalah apakah protein memerlukan modifikasi setelah produksi awal.Ini sering terjadi pada protein mamalia.Bakteri sering tidak memodifikasi protein tersebut dengan benar, sehingga ekspresi berlebih dari protein yang lebih maju ini sering dilakukan dalam sel serangga atau mamalia.Sejumlah perusahaan bioteknologi berspesialisasi dalam melakukan produksi protein rekombinan.