Τι είναι η διαφορική χρώση;

Αν και τα μικρόβια ή τα ζωικά κύτταρα μπορούν να είναι ορατά κάτω από το μικροσκόπιο, τα μεμονωμένα μέρη του μικροσκοπικού κυττάρου μπορεί να είναι δύσκολο να διαφοροποιηθούν καθώς τα χρώματα κάτω από το μικροσκόπιο μπορεί να εμφανιστούν όμοια ή το κύτταρο να εμφανίζεται.Οι εργαστηριακοί αναλυτές που ειδικεύονται στη μικροσκοπική ανάλυση των κυττάρων χρησιμοποιούν μεθόδους χρώσης για να μεταδώσουν τα χρώματα στο κύτταρο, ώστε να μπορούν να δουν με σαφήνεια τα μέρη.Η διαφορική χρώση αναφέρεται στον τύπο χρώσης που επιτρέπει στον αναλυτή να λέει διαφορετικούς τύπους κυττάρων.Είναι ένας γενικός όρος που περιλαμβάνει μια ποικιλία διαδικασιών χρώσης.

Όταν ένα ζώο χωρίζεται στα κύτταρα του, τα κύτταρα μπορεί να ποικίλουν σε εμφάνιση και σε λειτουργία.Συνήθως διαφορετικά είδη έχουν σύνολα κυττάρων που εμφανίζονται μεμονωμένα κάτω από το μικροσκόπιο.Ένα κοινό παράδειγμα των διαφορετικών ειδών και των ομάδων είναι ο τρόπος με τον οποίο τα περισσότερα βακτήρια μπορούν να χωριστούν σε δύο ομάδες με βάση την αντίδρασή τους σε ένα συγκεκριμένο είδος λεκέδων που ονομάζεται λεκέ Gram.Ο Hans Christian Gram ήταν ένας δανικός μικροβιολόγος που εφευρέθηκε για πρώτη φορά το λεκέ το 1844, ο οποίος εξακολουθεί να είναι σε κοινή χρήση ως χρήσιμο πρώτο βήμα της βακτηριακής ταυτοποίησης σε εργαστηριακό περιβάλλον.

Σε διαφορική χρώση, ένα δείγμα βακτηριακού πληθυσμού αντιμετωπίζεται με σύνολα χρωστικών σε μια διαδικασία που περιλαμβάνει βήματα όπως η θέρμανση και το πλύσιμο των δειγμάτων, έτσι ώστε η βαφή να εισέλθει σε όλα τα κύτταρα.Τα διάφορα βήματα χρησιμοποιούν βαφές όπως το Crystal Violet και το Fuchsin, μαζί με άλλες ουσίες όπως το αλκοόλ και το ιώδιο για να βοηθήσουν στην επίλυση του χρώματος.Τα κύτταρα που εμφανίζονται ροζ αναγνωρίζονται ως Gram αρνητικά, ενώ τα μπλε κύτταρα στο τέλος της διαδικασίας είναι θετικά Gram.Αυτή η διαφορά χρώματος βοηθά τον μικροβιολόγο να εντοπίσει τον τύπο του κυτταρικού τοιχώματος που έχει το είδος, το οποίο βοηθά να περιορίσει τον πιθανό κατάλογο των ειδών που ανήκει ένα άγνωστο δείγμα.Εκτός από την ένδειξη τύπου Gram, η διαδικασία διαφορικής χρώσης καθιστά τα σχήματα και τις ρυθμίσεις των κυττάρων πιο προφανείς, γεγονός που βοηθά επίσης στην ταυτοποίηση.

Τα ζωικά κύτταρα μπορούν επίσης να ταξινομηθούν κάτω από το μικροσκόπιο με διαφορική χρώση.Για παράδειγμα, τα κύτταρα που κυκλοφορούν στο αίμα αντιδρούν διαφορετικά σε ορισμένους λεκέδες.Ένα παράδειγμα είναι το λεκέ του Wright, το οποίο ενσωματώνει βαφές όπως η ηωσίνη και το μεθυλενικό μπλε, και που μπορεί να πει σε έναν εργαστηριακό αναλυτή ποιοι τύποι κυττάρων αίματος υπάρχουν σε ένα δείγμα και σε ποια συγκέντρωση.Για παράδειγμα, ένα κύτταρο ηωσινόφιλων τείνει να αναλάβει πολύ χρωματισμό ηωσίνης σε σύγκριση με άλλα κύτταρα αίματος.Οι αναλυτές χρησιμοποιούν γενικά χρωματισμό λεκέδων που προσδιορίζεται μέσω διαφορικής χρώσης μαζί με άλλα χαρακτηριστικά κυττάρων όπως το μέγεθος, το σχήμα και τις εσωτερικές δομές για να καταλάβουν ποια κύτταρα βρίσκονται σε δείγμα.