Skip to main content

Τι είναι το συζυγές αντισωμάτων;

Ένα συζυγές αντισώματος είναι ένα μόριο επισήμανσης που μπορεί να χρησιμοποιηθεί σε ιστολογικές ή ενζυματικές δοκιμασίες ανίχνευσης αντιγόνου για τον εντοπισμό δεσμευμένων αντισωμάτων.Λειτουργεί με το φυσικά συνδεδεμένο ή συζευγμένο, με το αντίσωμα που χρησιμοποιείται για την επισήμανση ενός αντιγόνου ενδιαφέροντος.Ένα αντίσωμα που έχει επισημανθεί σε ένα συζυγές αντισωμάτων είναι ένα εργαλείο που χρησιμοποιείται συχνά στην έρευνα για τον προσδιορισμό είτε την ακριβή θέση είτε την ποσότητα των πρωτεϊνών ή των αντιγόνων ενδιαφέροντος, έναντι των οποίων το αντίσωμα ή τα αντισώματα αυξήθηκαν.Τα αντισώματα ως αντιδραστήριο στις τεχνικές έρευνας με τις οποίες μπορούν να επισημανθούν συγκεκριμένες πρωτεΐνες.Εκθέτοντας ένα αντιγόνο ή πρωτεΐνη ενδιαφέροντος σε ένα αντίσωμα που αυξήθηκε εναντίον του, τα αντιγόνα ή οι πρωτεΐνες μπορούν να επισημανθούν.Χρησιμοποιώντας ένα συζυγές αντισώματος mdash;Δηλαδή, ένα αντίσωμα που έχει συζευγμένο με ένα μόριο που χρησιμοποιείται ειδικά ή συντίθεται για να ανιχνευθεί εύκολα mdash;Τα αντισώματα στα αντίστοιχα αντιγόνα τους μπορούν στη συνέχεια να ταυτοποιηθούν και να προσδιοριστούν.Ο πιο συνηθισμένος τύπος συζυγούς αντισώματος είναι ένα φθορίζον μόριο, επιτρέποντας την ταυτοποίηση αντιγόνων στον ιστό υπό φθορίζοντα μικροσκόπιο.Άλλα συζεύγματα περιλαμβάνουν μόρια όπως η υπεροξειδάση των ραδιοφωνικών αλόγων, η οποία χρησιμοποιείται σε σύζευξη με αντισώματα για μεταγενέστερη ανάπτυξη με διαμινοβενζιδίνη (DAB).πρωτογενές αντίσωμα.Για παράδειγμα, κάποιος μπορεί να ενδιαφέρεται για τον εντοπισμό ενός αντιγόνου που ονομάζεται αντιγόνο X. Στη συνέχεια, θα χρησιμοποιούσε, για παράδειγμα, ένα αντίσωμα που ανυψώθηκε σε ένα ποντίκι που αντιδρά και κολλάει στο αντιγόνο Χ.και δεσμευμένο σε αυτά τα μόρια αντιγόνου Χ, θα χρησιμοποιηθεί ένα δευτερογενές αντίσωμα τότε και mdash;Για παράδειγμα, κάποιος που μεγάλωσε σε μια κατσίκα mdash;Αυτό θα επισημανόταν με ένα συζευγμένο που καθιστά αυτό το δευτερεύον αντίσωμα ανιχνεύσιμο σε ενζυματικές ή φθορίζουσες μικροσκοπικές δοκιμασίες.Για τους προσδιορισμούς στον εντοπισμό των αντιγόνων χρησιμοποιώντας ηλεκτρονικό μικροσκόπιο, τα σωματίδια χρυσού χρησιμοποιούνται συχνά ως συζυγές αντισωμάτων επειδή μπορούν να ανιχνευθούν χρησιμοποιώντας μια δέσμη ηλεκτρονίων.

Ο λόγος για τη χρήση πρωτογενών και δευτερογενών αντισωμάτων, αντί να χρησιμοποιεί μια σύζευξη αντισωμάτων στο οποίο το πρωτεύονΤο αντίσωμα είναι άμεσα συζευγμένο, είναι η αποτελεσματικότητα του κόστους.Η σύζευξη αντισωμάτων είναι δαπανηρή από την άποψη του χρόνου και των αντιδραστηρίων.Ειδικά για ασυνήθιστα αντιγόνα, η σύζευξη αντισωμάτων στα πρωτογενή αντισώματα δεν αξίζει το κόστος της παραγωγής.Αντίθετα, χρησιμοποιώντας τη σύζευξη αντισωμάτων σε δευτερογενή αντισώματα, μεγάλες ποσότητες συζευγμένου αντισώματος μπορούν να συντεθούν ταυτόχρονα και να χρησιμοποιηθούν σε δοκιμασίες με μια σειρά πρωτογενών αντισωμάτων προσαρμοσμένα για να εντοπίσουν πολλά διαφορετικά αντιγόνα, καθιστώντας την παραγωγική διαδικασία χρήσης και οικονομικά αποδοτικού.Σε ορισμένες περιπτώσεις, ωστόσο, ένα πρωτογενές αντίσωμα θα επισημανθεί για να μειώσει τον θόρυβο στο σήμα ανίχνευσης λόγω της αυξημένης μη ειδικής δέσμευσης αντισώματος που προκύπτει από τη χρήση πολλαπλών αντισωμάτων.Ενώ αυτές οι ακριβές, εξαιρετικά ευαίσθητες δοκιμασίες θα εξακολουθούν να απαιτούν αυτή τη μέθοδο.Είναι δυνατόν να αγοράσετε κιτ που επιτρέπουν σε έναν ερευνητή να επισημάνει τα συζεύγματα στο δικό του αντίσωμα επιλογής, αυξάνοντας το κόστος του αντιδραστηρίου, αλλά μειώνοντας τα βήματα του πρωτοκόλλου και ενδεχομένως την αύξηση της αναλογίας σήματος προς θόρυβο στην τελική δοκιμασία ανίχνευσης αντισώματος.