Skip to main content

Τι είναι η δοκιμασία ELISA;

Μια δοκιμασία ELISA είναι μια διαδικασία δοκιμής που ανιχνεύει ουσίες προκειμένου να εντοπιστούν ορισμένες ασθένειες, αλλεργίες και παράνομα ναρκωτικά στο σώμα.Είναι επίσης γνωστό ότι χρησιμοποιείται για την ανίχνευση του ιού της ανθρώπινης ανοσοανεπάρκειας (HIV).Μερικές από τις ουσίες που μπορεί να ανιχνεύουν είναι αντισώματα, ορμόνες και πρωτεΐνες.Η κύρια αρχή πίσω από τον προσδιορισμό ELISA είναι ότι μια χημική αντίδραση μεταξύ του υγρού δείγματος ενός ασθενούς και ενός συγκεκριμένου εργαστηριακού δείγματος υποδεικνύει την παρουσία μιας συγκεκριμένης ουσίας που σχετίζεται με μια συγκεκριμένη ασθένεια ή ιατρική κατάσταση.Η ELISA, ως ακρωνύμιο, αντιπροσωπεύει "ανοσοπροσροφητική δοκιμασία συνδεδεμένη με ένζυμο".αντίδραση.Στη δεκαετία του 1960, δύο ξεχωριστές ομάδες επιστημόνων που πρωτοστάτησαν από τους Stratis Avrameas και G.B.Ο Pierce έγινε επιτυχής στη συνεργασία ορισμένων αντισωμάτων με ορισμένα ένζυμα και στην παραγωγή χημικής αντίδρασης από τον συνδυασμό.Με αυτή τη γνώση, δύο επιστήμονες από το Πανεπιστήμιο της Στοκχόλμης, Peter Perlmann και Eva Engvall, εφευρέθηκαν η μέθοδος ELISA, δημοσιεύοντας τα πειράματά τους και το σύστημα πίσω από τη δοκιμασία το 1971. Από τότε, η δοκιμασία ELISA έχει χρησιμοποιηθεί παγκοσμίως, αν και η ραδιοανοσία είναιΑκόμα διαθέσιμο λόγω του μικρότερου κόστους του.

Υπάρχουν δύο κοινά είδη προσδιορισμού ELISA: η άμεση και η έμμεση μέθοδος, η οποία χρησιμοποιείται συχνότερα.Το πρώτο βήμα θα ήταν να εξαγάγετε ένα δείγμα από τον ασθενή, συνήθως αίμα ή ούρα, τα οποία και τα δύο μπορεί να υποβληθούν σε μια διαδικασία διαχωρισμού για την εξαγωγή του καθαρού ορού που περιέχει τα αντισώματα.Ένα κιτ ELISA περιέχει συχνά ένα πιάτο που συγκρατεί 96 μίνι-containers που ονομάζεται "Wells", το οποίο θα επικαλυφθεί με ένα αντιγόνο που μπορεί να έχει αντίδραση σε ένα σημερινό αντίσωμα.Ένα αντιγόνο θεωρείται συχνά ξένη ουσία ότι ο οργανισμός επιτίθεται με την παραγωγή ειδικών αντισωμάτων, οπότε αν ένας ασθενής έχει αποκτήσει αντιγόνο από μια συγκεκριμένη νόσο, ο ορός του πρέπει να περιέχει αντισώματα που αντιστοιχούν στο εν λόγω αντιγόνο.

Ο ορός του ασθενούς θα είναι τότεχύνεται στα πηγάδια και στη συνέχεια επωάστηκε για να αφήσει τα αντισώματα να προσκολληθούν στην επικάλυψη πρωτεΐνης.Μετά την περίοδο επώασης, τα φρεάτια ξεπλένονται για να αφαιρέσουν το υπόλοιπο ορό και άλλα αντισώματα που δεν έχουν δεσμευτεί στην επικάλυψη.Ένα άλλο σύνολο αντισωμάτων που εξάγονται από ζώα, συνήθως αρουραίοι, θα χυθούν στα πηγάδια για την ανίχνευση των ανθρώπινων αντισωμάτων και θα πραγματοποιηθεί μια άλλη περίοδος επώασης και τα ζωικά αντισώματα θα ξεπλυθούν ξανά.Στη συνέχεια θα προστεθεί ένα υπόστρωμα ενζύμου, ώστε η αντίδραση να μπορεί να εμφανιστεί εμφανώς σε χρώματα.Συνήθως, μια ισχυρή απόχρωση του χρώματος θα υποδεικνύει ένα θετικό αποτέλεσμα, που σημαίνει ότι ο ασθενής έχει δοκιμαστεί η ασθένεια ή άλλες ιατρικές παθήσεις.