Apa itu isolasi RNA total?
Total isolasi asam ribonukleat (RNA) adalah teknik laboratorium yang digunakan untuk mengekstrak semua RNA seluler dari sampel jaringan.Ini berbeda dari metode pemrosesan lain yang secara selektif menarik jenis RNA tertentu.Seorang peneliti mungkin, misalnya, ingin memeriksa RNA messenger (mRNA) dan dapat bekerja dengan sampel untuk mengekstrak bahan genetik ini.Ada sejumlah protokol laboratorium yang tersedia untuk total isolasi RNA, menggunakan berbagai produk yang dibuat oleh pemasok ilmiah.
Mungkin ada sejumlah keuntungan untuk mengumpulkan semua RNA seluler dari sampel jaringan.Ini dapat menghasilkan informasi yang lebih murni dan dapat digunakan.Teknik ini juga dapat memungkinkan para peneliti untuk memeriksa degradasi yang dapat menyebabkan masalah dengan eksperimen.Jika sampel berkualitas buruk, peneliti dapat mengekstrak RNA lagi untuk mendapatkan koleksi RNA yang lebih bersih dan lebih berguna.Ini bisa menjadi penting untuk banyak jenis penelitian, di mana RNA yang buruk pada awalnya menyebabkan masalah dengan percobaan di telepon.
Teknik untuk isolasi total RNA dapat melibatkan berbagai agen kimia.Beberapa fokus pada penggunaan bahan kimia tidak beracun untuk mengurangi risiko kerusakan pada sampel.Bahan kimia semacam itu juga membatasi polusi hilir RNA dan lebih aman untuk pekerja lab.Laboratorium cenderung memilih bahan kimia dan protokol tertentu untuk merekomendasikan kepada semua personel dan menyertakan deskripsi terperinci tentang prosedur isolasi RNA total dalam manual mereka.Ini memastikan konsistensi dalam pemrosesan RNA di fasilitas untuk menghasilkan hasil yang lebih stabil dan bermanfaat.
Proses dimulai dengan persiapan sampel jaringan, yang dapat bervariasi dalam ukuran, untuk menyiapkannya untuk perawatan reagen kimia mana yang akan menarik total RNA.Teknisi berkonsultasi dengan manual lab untuk menentukan cara menangani sampel dan memperlakukannya untuk mengisolasi RNA.Mereka dapat menggunakan alat seperti pelat elektroforesis untuk memeriksa kualitas sampel, mencari tanda -tanda degradasi yang mungkin menunjukkan masalah dengan total proses isolasi RNA.
Peneliti dapat melakukan isolasi RNA total mereka sendiri atau mendelegasikan tugas ini kepada asisten laboratorium lab, mahasiswa pascasarjana, atau pekerja lab serupa.Dimungkinkan juga untuk mengontrak isolasi ke fasilitas lab lainnya.Ini kadang -kadang mungkin diperlukan untuk melindungi integritas percobaan, dengan menggunakan pihak ketiga untuk menghasilkan hasil yang dapat diverifikasi dan berulang.Dalam makalah ilmiah apa pun berdasarkan penelitian dengan RNA yang terisolasi, peneliti perlu membahas metode yang digunakan untuk isolasi, dan siapa yang melakukan pekerjaan.