Ano ang isang recombinant plasmid?

Ang isang plasmid ay isang pabilog na piraso ng DNA na matatagpuan sa maraming bakterya.Ang pinaka -kilalang tampok ng plasmids ay ang kanilang pagtitiklop nang nakapag -iisa sa pangunahing DNA ng host.Kadalasan ang isang plasmid ay ginagamit sa teknolohiya ng pag -clone ng recombinant upang mai -clone ang mga bagong nakahiwalay na gen.Karaniwan din na gumamit ng isang recombinant plasmid upang maipahayag ang malaking halaga ng isang kilalang gene upang makakuha ng RNA o protina mula rito.Ang nasabing recombinant na expression ng gene ay kailangang -kailangan para sa industriya ng biotechnology.Maraming iba pang mga uri ng bakterya ang maaaring makahawak ng naturang plasmids.Ang mga piraso ng self-replicating DNA na ito ay maaaring maglipat ng natural sa pagitan ng iba't ibang uri ng bakterya.Sa kabila nito, kung minsan ay mahirap ipakilala ang mga recombinant plasmids sa iba pang mga uri ng bakterya.

Ang pangunahing pamamaraan para sa pagpapakilala ng DNA sa iba pang mga cell ay kilala bilang pagbabagong -anyo, kung saan ang mga bakterya ay ginagamot sa mga kemikal na ginagawang mas malamang na kumuha ng dayuhang DNA.Ang isa pang pamamaraan ay nagsasangkot ng nakakagulat na bakterya na may isang de -koryenteng kasalukuyang.Ito ay kilala bilang electroporation. Mga dahilan para sa paglikha ng isang recombinant plasmid na magkakaiba.Kadalasan kapag ang DNA ay unang nakahiwalay mula sa isang partikular na tisyu o organismo, ito ay binago sa mga plasmids upang lumikha ng isang silid -aklatan.Pagkatapos ang DNA ay maaaring makuha mula sa mga indibidwal na kolonya.Susunod, maaari silang mai -screen ng pagkakasunud -sunod ng DNA upang matukoy kung anong mga uri ng mga gene ang naroroon, kung ang mga pagkakasunud -sunod ay naroroon sa isang database.Minsan ang mga gene na may hindi kilalang mga pag -andar ay na -clone.Ang gene ay maaaring mai-clone sa mga recombinant plasmids na over-expression vectors.Ang mga ito ay dinisenyo lalo na upang makagawa ng malaking halaga ng RNA o protina.Ito ay partikular na mahalaga para sa mga recombinant na protina ng tao, na dati ay madalas na magagamit lamang mula sa mga cadavers, na napakahirap na pag -aralan ang pag -andar ng isang partikular na gene.Ang plasmid ay dapat magkaroon ng isang napiling marker.Ginagawa nitong posible na pumili ng isang cell na may gene.Karaniwan, ang populasyon ng mga cell na kulang sa gene na may marker ay lubos na nubbog ang dami ng mga cell na nagdadala nito.Karaniwan ang isang recombinant plasmid ay may pagtutol sa isang antibiotic, o maaaring lumago sa kawalan ng isang partikular na amino acid.Bilang karagdagan, ang isang recombinant plasmid ay nangangailangan ng isang hanay ng mga espesyal na pagkakasunud -sunod upang payagan ang isang paghihigpit na enzyme na i -clear ang DNA upang payagan ang isang gene na maipasok sa cloning vector.Mayroong isang malaking bilang ng mga paghihigpit na mga enzyme na lubos na dalubhasa para sa mga tiyak na pagkakasunud -sunod ng DNA na dapat naroroon kung saan nagsisimula at nagtatapos ang gene.Bilang karagdagan, may mga bagong kit na gumagamit ng espesyal na itinayo na mga bakterya ng bakterya upang mapadali ang labis na pagpapahayag ng produkto ng gene.Pinagsasama nila ang teknolohiya para sa pag -clone ng isang gene na may isang pamamaraan na nagbibigay -daan para sa madaling paglilinis ng protina na ipinahayag mula sa gene sa sandaling ito ay na -clone sa recombinant plasmid.