Mi az a fehérje csapadék?

A fehérje csapadék egy olyan módszer, amellyel oldatban tartott fehérjék kivonására és tisztítására szolgál.A nagy, komplex molekuláknak, a fehérjéknek általában olyan részei vannak, amelyek negatív elektromos töltéssel rendelkeznek, és olyan részek, amelyek pozitív töltésűek, valamint hidrofil és hidrofób alkatrészek.A fehérjék tendenciája az oldatban, hogy összegyűjtsék és kicsapják a molekulák negatív és pozitív töltésű részeinek vonzódása és a hidrofób részek kölcsönös vonzereje miatt.Ennek a tendenciának az ellensúlyozása azonban az a tény, hogy egy vizes oldatban a poláris vízmolekulák hajlamosak a fehérjemolekulák körül, mivel a víz és a fehérjemolekulák ellentétesen töltött részei közötti elektrosztatikus vonzerő.Ennek eredményeként a fehérjemolekulákat külön tartják és oldatban maradnak, de vannak különféle módszerek a fehérjék csapadékának elérésére.sózás.A leggyakrabban használt só ammónium -szulfát.A só -ionok és a vízmolekulák kölcsönhatása eltávolítja a fehérje molekulák vízgátját, lehetővé téve a fehérje hidrofób részeinek érintkezésbe kerülését.Ennek eredményeként a proteinmolekulák együtt aggregálódnak és kicsapódnak az oldatból.Általános szabály, hogy minél magasabb a fehérje molekulatömege, annál alacsonyabb a só koncentrációja, amelyre szükség van a csapadék okozásához, tehát az oldatban lévő különböző fehérjék keverékét a só koncentrációjának fokozatos növelésével lehet elválasztani, hogy úgyA különböző fehérjék különböző szakaszokban kicsapódnak, ezt a folyamatot frakcionált csapadéknak hívják.Ennek az a következménye, hogy csökkenti a dielektromos állandóságot, amelyet ebben az összefüggésben az oldószer polaritásának mértékének lehet tekinteni.A polaritás csökkenése azt jelenti, hogy kevésbé van hajlam az oldószermolekulákra a fehérje körüli csoportosulása, így a fehérjemolekulák között kevésbé van vízgát, és nagyobb a hajlam a fehérje csapadékra.Számos szerves oldószer kölcsönhatásba lép a proteinmolekulák hidrofób részeivel, denaturációt okozva;Néhányuk, például az etanol és a dimetil -szulfoxid (DMSO), nem.és elválasztja őket az elektrosztatikus tagadás révén.Savas körülmények között, alacsony pH -val, a fehérjék általában általános pozitív töltéssel rendelkeznek, míg magas pH -nál a töltés negatív.A fehérjéknek van egy közbenső pontja, amelyen nincs általános töltés és mdash;Ezt izoelektromos pontnak nevezik, és a legtöbb fehérje esetében a 4-6 pH-tartományban fekszik.Az oldott fehérje izoelektromos pontja sav, általában sósav vagy kénsav hozzáadásával érhető el, hogy a pH -t a megfelelő szintre csökkentse, lehetővé téve a fehérje molekulák csoportosulását és csapadékát.Ennek a módszernek az a hátránya, hogy a savak hajlamosak denaturálni a fehérjét, de gyakran használják a nem kívánt fehérjék eltávolítására.Az előbbi csökkenti a rendelkezésre álló vízmennyiséget, hogy gátot képezzen a fehérjemolekulák között, lehetővé téve számukra, hogy összegyűjtsék és csapdába ejtsék.A pozitív töltésű fémionok kötődhetnek a protein molekula negatív töltésű részeivel, csökkentve a fehérje hajlamát, hogy vonzzák a körülötte lévő vízmolekulák rétegét, ismét lehetővé téve a fehérje molekuláknak, hogy kölcsönhatásba lépjenek egymással és kicsapódjanak az oldatból.A fémionok még nagyon híg oldatokban is hatékonyak.