Ano ang pag -ulan ng protina?

Ang pag -ulan ng protina ay isang pamamaraan na ginamit upang kunin at linisin ang mga protina na gaganapin sa isang solusyon.Malaki, kumplikadong mga molekula, ang mga protina sa pangkalahatan ay may mga bahagi na may negatibong singil sa kuryente at mga bahagi na may positibong singil, pati na rin ang mga bahagi ng hydrophilic at hydrophobic.Mayroong isang pagkahilig para sa mga protina sa solusyon upang magkasama at magtapos dahil sa pang -akit sa pagitan ng negatibo at positibong sisingilin na mga bahagi ng mga molekula at ang kapwa pang -akit ng mga bahagi ng hydrophobic.Gayunman, ang pag -aalsa ng tendensiyang ito, ay ang katotohanan na sa isang may tubig na solusyon, ang mga molekula ng tubig, na polar, ay may posibilidad na ayusin ang kanilang mga sarili sa paligid ng mga molekula ng protina dahil sa pang -akit ng electrostatic sa pagitan ng magkakasamang sisingilin na mga bahagi ng mga molekula ng tubig at protina.Nagreresulta ito sa mga molekula ng protina na pinapanatili at natitira sa solusyon, ngunit may iba't ibang mga pamamaraan para sa pagkamit ng pag -ulan ng mga protina.Salting out.Ang asin na madalas na ginagamit ay ammonium sulfate.Ang pakikipag -ugnay ng mga ion ng asin na may mga molekula ng tubig ay nag -aalis ng hadlang ng tubig sa pagitan ng mga molekula ng protina, na nagpapahintulot sa mga hydrophobic na bahagi ng protina na makipag -ugnay.Nagreresulta ito sa mga molekula ng protina na pinagsama -sama at pag -ubos ng solusyon.Bilang isang pangkalahatang tuntunin, mas mataas ang molekular na bigat ng protina, mas mababa ang konsentrasyon ng asin na kinakailangan upang maging sanhi ng pag -ulan, kaya posible na paghiwalayin ang isang halo ng iba't ibang mga protina sa solusyon sa pamamagitan ng unti -unting pagtaas ng konsentrasyon ng asin, upangAng iba't ibang mga protina ay umuusbong sa iba't ibang yugto, isang proseso na kilala bilang fractional na pag -ulan.

Ang solubility ng isang protina sa isang may tubig na daluyan ay maaaring mabawasan sa pamamagitan ng pagpapakilala ng isang organikong solvent.Ito ay may epekto ng pagbabawas ng dielectric na pare -pareho, na sa kontekstong ito ay maaaring ituring bilang isang sukatan ng polarity ng isang solvent.Ang isang pagbawas sa polarity ay nangangahulugang may mas kaunting pagkahilig para sa mga solvent na molekula na kumpol sa paligid ng mga protina, upang mas mababa sa isang hadlang sa tubig sa pagitan ng mga molekula ng protina at isang mas malaking pagkahilig sa pag -ulan ng protina.Maraming mga organikong solvent ang nakikipag -ugnay sa mga hydrophobic na bahagi ng mga molekula ng protina, na nagiging sanhi ng denaturization;Gayunpaman, ang ilan, tulad ng ethanol at dimethyl sulfoxide (DMSO), ay hindi.

bagaman ang mga protina ay maaaring magkaroon ng negatibo at positibong sisingilin na mga bahagi, madalas, sa solusyon, magkakaroon sila ng pangkalahatang positibo o negatibong singil na nag -iiba ayon sa pH,at pinapanatili ang mga ito sa pamamagitan ng electrostatic repulsion.Sa mga kondisyon ng acidic, na may isang mababang pH, ang mga protina ay may posibilidad na magkaroon ng isang pangkalahatang positibong singil, habang nasa mataas na pH, negatibo ang singil.Ang mga protina ay may isang intermediate point kung saan walang pangkalahatang singil at mdash;Ito ay kilala bilang ang isoelectric point at para sa karamihan ng mga protina, namamalagi ito sa saklaw ng pH 4-6.Ang isoelectric point para sa isang natunaw na protina ay maaaring maabot sa pamamagitan ng pagdaragdag ng isang acid, karaniwang hydrochloric o sulfuric acid, upang mabawasan ang pH sa naaangkop na antas, na nagpapahintulot sa kumpol at pag -ulan ng mga molekula ng protina.Ang isang kawalan ng pamamaraang ito ay ang mga acid ay may posibilidad na denature ang protina, ngunit madalas itong ginagamit upang alisin ang mga hindi ginustong mga protina.Ang dating bawasan ang dami ng tubig na magagamit upang makabuo ng isang hadlang sa pagitan ng mga molekula ng protina, na nagpapahintulot sa kanila na magkasama at magtapos.Ang mga positibong sisingilin na mga ion ng metal ay maaaring makipag -ugnay sa negatibong sisingilin na mga bahagi ng molekula ng protina, binabawasan ang pagkahilig ng protina upang maakit ang isang layer ng mga molekula ng tubig sa paligid nito, na pinapayagan ang mga molekula ng protina na makihalubilo sa isa't isa at umuusbong sa labas ng solusyon.Ang mga metal ion ay epektibo kahit na sa napaka -dilute na mga solusyon.