Τι είναι η δοκιμασία μετατόπισης της ηλεκτροφορητικής κινητικότητας;

Μια δοκιμασία είναι μια δοκιμή που έχει σχεδιαστεί για να διαχωρίζει τα αρχικά κομμάτια ενός κυττάρου σε μέρη που είναι εύκολο να ταυτοποιηθούν.Η δοκιμασία μετατόπισης της ηλεκτροφορητικής κινητικότητας είναι ένα πείραμα που χρησιμοποιεί ηλεκτρική ενέργεια για να μετακινήσει μακρομόρια, όπως πρωτεΐνες, μέσω μιας μήτρας πηκτής για να προκαλέσει διαχωρισμό μεταξύ των διαφόρων μακρομορίων με βάση το μέγεθος.Όπως μια μπαταρία αυτοκινήτου, τα αρνητικά και θετικά άκρα βρίσκονται σε αντίθετες πλευρές της δοκιμασίας μετατόπισης της ηλεκτροφορητικής κινητικότητας ή της δοκιμασίας μετατόπισης πηκτώματος.Αυτό προκαλεί ηλεκτρική ενέργεια για να προσελκύσει τα μακρομόρια με βάση το φορτίο.Κάθε μακρομόριο μετακινείται με διαφορετικό ρυθμό, καθώς οι μικρότερες εμφανίζονται μικρότερες παρεμβολές από το πήκτωμα.

Απαιτούνται διάφορα βήματα για τη δημιουργία μιας δοκιμασίας μετατόπισης ηλεκτροφορητικής κινητικότητας.Τα μακρομόρια που πρέπει να διαχωριστούν πρέπει πρώτα να παρασκευαστούν.Τα περισσότερα μακρομόρια λαμβάνονται από ζωντανά κύτταρα και απαιτούν συγκεκριμένες διαδικασίες.Η απόκτηση των τμημάτων που διαχωρίζονται συχνά απαιτεί μια φυγοκεντρική και μια χημική αντίδραση που διασπά τα κύτταρα.Η φυγόκεντρο θα περιστρέψει ένα φιαλίδιο σε υψηλή ταχύτητα και θα σχηματίσει ένα σφαιρίδιο των μακρομορίων που απαιτούνται.Αυτό διαλύεται και συχνά προστίθεται χρώμα ή άλλη ετικέτα για να βοηθήσει στην παρακολούθηση της δοκιμασίας μετατόπισης πηκτής.

Το πήκτωμα, που μερικές φορές ονομάζεται κρεβάτι, πρέπει επίσης να είναι φρέσκο από ένα ακριβές μίγμα αγαρόζης σε σκόνη και νερό που μετατρέπεται γρήγορα από υγρό σε πηκτή.Συνήθως μια δοκιμασία μετατόπισης της ηλεκτροφορητικής κινητικότητας θα έχει αρκετές λωρίδες για ξεχωριστές δοκιμασίες, οι οποίες χρησιμοποιούνται για τη σύγκριση διαφορετικών μιγμάτων μακρομορίων.Μια λωρίδα είναι πάντα ρυθμισμένη ως έλεγχος και συνήθως έχει μόνο ένα είδος μακρομορίων.

Η πηγή τροφοδοσίας πρέπει να επιλεγεί προσεκτικά και δεν είναι συνδεδεμένο μέχρι τα πάντα να είναι έτοιμα.Ο χρόνος που η ισχύς είναι η ισχύς καθορίζει τη μετατόπιση της κινητικότητας των μακρομορίων.Είναι σημαντικό να διαχωρίσετε τα κομμάτια αρκετά για σωστή ανάλυση.Εάν η ισχύς δεν είναι σωστά χρονομετρημένη, οι μελλοντικές συγκρίσεις θα είναι επίσης ανακριβείς.Η κατεύθυνση των μακρομορίων θα καθοριστεί από την χρέωση που διαθέτουν φυσικά mdash;Οι περισσότεροι κινούνται προς το αρνητικό τέλος.

Οι απλές γενετικές δοκιμές και οι αναλύσεις πρωτεϊνών γίνονται συνήθως με μια δοκιμασία μετατόπισης ηλεκτροφορητικής κινητικότητας.Αυτό εμφανίζεται με διαφορετικές μετατοπίσεις σε διαφορετικές λωρίδες.Εάν εμφανιστεί μια αλληλεπίδραση, τα μακρομόρια συνδυάζονται και τρέχουν πιο αργά μέσω της μήτρας σε σύγκριση με τη λωρίδα ελέγχου με μόνο ένα μακρομόριο.Οι δοκιμασίες μετατόπισης πηκτώματος χρησιμοποιούνται για την ταχεία εξάλειψη ή επιβεβαίωση γενετικών αποτελεσμάτων ότι οι περίπλοκες μέθοδοι θα μπορούσαν να διαρκέσουν περισσότερο για να ολοκληρωθούν.Μπορούν επίσης να προσδιορίσουν εάν τα αντισώματα, ένα μακρομόριο ανοσοποιητικό σύστημα, να κολλήσουν σε πρωτεΐνες που μπορούν να χρησιμοποιηθούν για την καταπολέμηση των βακτηρίων και των ιών.