Τι είναι το πήκτωμα πολυακρυλαμιδίου;

Το πήκτωμα πολυακρυλαμιδίου είναι ένα διάλυμα που χρησιμοποιείται συνήθως στην ηλεκτροφόρηση, τη διαδικασία διαχωρισμού διαφορετικών μορίων ή σωματιδίων με τη διέλευση τους μέσω ενός πηκτώματος και εφαρμόζοντας ηλεκτρικό ρεύμα.Υπάρχουν διαφορετικές συνταγές για πηκτή πολυακρυλαμιδίου, αλλά συνήθως περιέχει ακρυλαμίδιο, νερό, ρυθμιστικό διάλυμα, υπερουλφικό αμμωνίου (APS) και τετραμεθυλαιθυλενοδιαμίνη (TEMED).Αυτό το πήκτωμα λειτουργεί ως μήτρα που χωρίζει τις ενώσεις με βάση το φορτίο και το μέγεθος τους.Το περισσότερο ακρυλαμίδιο στο διάλυμα πηκτής, τόσο καλύτερος διαχωρισμός των μικρότερων μορίων.Συνήθως αυτό το πήκτωμα χρησιμοποιείται για τον διαχωρισμό πρωτεΐνης και DNA.

Στην ηλεκτροφόρηση, ένα ηλεκτρικό πεδίο προκαλεί τα φορτισμένα σωματίδια να κινούνται μέσω ενός πηκτώματος, το οποίο λειτουργεί σαν κόσκινο για να προκαλέσει τη διαχωρισμό των σωματιδίων διαφορετικού μεγέθους.Το πήκτωμα θα απορροφήσει οποιαδήποτε θερμότητα που παράγεται από το ηλεκτρικό ρεύμα.Το πήκτωμα πολυακρυλαμιδίου χρησιμοποιείται συνήθως σε αυτή τη διαδικασία, αλλά η αγαρόζη, μια άλλη χημική ουσία που δημιουργεί παρόμοιο πήκτωμα, μπορεί επίσης να χρησιμοποιηθεί. Τα πηκτώματα μπορούν να κατασκευαστούν από διαφορετική συγκέντρωση, με την ποσότητα ακρυλαμιδίου που κυμαίνεται από περίπου 6% έως 15%.Όταν αναμιγνύεται το πήκτωμα, το ακρυλαμίδιο είναι μη διαλογισμένο, πράγμα που σημαίνει ότι παραμένει ως μεμονωμένα μόρια.Η προσθήκη άλλων χημικών ουσιών που προάγουν τη δέσμευση, όπως το Temed, αναγκάζει τα μόρια να συνδέονται μαζί σχηματίζοντας μεγάλες αλυσίδες mdash.Το πολυακρυλαμίδιο του πολυακρυλαμιδίου.

Το κύριο πλεονέκτημα της πηκτής πολυακρυλαμιδίου είναι ότι ο αριθμός των δεσμών σύνδεσης και της σκληρότητας μπορεί να ελεγχθεί με βάση την αρχική ποσότητα ακρυλαμιδίου και πρόσθεσης.Ένας κύριος παράγοντας στη συγκέντρωση ακρυλαμιδίου είναι το μέγεθος του αναλύσεων του μορίου.Όσο μικρότερες είναι διαχωρισμένες ενώσεις, τόσο περισσότερο ακρυλαμίδιο είναι απαραίτητο.Τα πολύ μικρά σωματίδια διαχωρίζονται χρησιμοποιώντας την υψηλότερη συγκέντρωση, 15 τοις εκατό.Η σκληρότητα του πηκτώματος καθορίζει την ποσότητα τριβής.Οι ενώσεις που είναι μεγάλες θα κινηθούν μέσω του πηκτώματος πιο αργά καθώς υπάρχει φυσικά περισσότερη τριβή ή αντίσταση λόγω του μεγέθους τους.Οι μικρότερες ενώσεις κινούνται ταχύτερα, καθώς υπάρχει λιγότερη τριβή.Για να αποφευχθεί η μετακίνηση των μικρών ενώσεων από το πήκτωμα, προστίθεται περισσότερο ακρυλαμίδιο για να δημιουργηθεί περισσότερη τριβή.

Το πήκτωμα πολυακρυλαμιδίου DNA χρησιμοποιείται για να διαχωριστούν οι κλώνοι DNA διαφορετικού μήκους.Τα κομμάτια του DNA θα διαχωριστούν κατά μόλις ένα νουκλεοτίδιο, οι ενώσεις που αποτελούν κάθε κλώνο.Για να γνωρίζουμε ποια κομμάτια αναφέρονται στα συγκεκριμένα μεγέθη, ένα πρότυπο που περιέχει θραύσματα ενός γνωστού μεγέθους εκτελείται συνήθως μαζί με δείγματα.Τα τεμάχια DNA συγκρίνονται στη συνέχεια με το πρότυπο και προσδιορίζεται το μέγεθος του κλώνου.

Μια παρόμοια διαδικασία χρησιμοποιείται για τον προσδιορισμό του μεγέθους των πρωτεϊνών, οι περισσότερες φορές εκείνες του αίματος.Το αίμα περιέχει δύο κύριους τύπους πρωτεΐνης: σφαιρίνη, πρωτεΐνη μεγάλου μεγέθους και αλβουμίνη ορού, μια πολύ μικρή, αρνητικά φορτισμένη πρωτεΐνη.Ο διαχωρισμός με τη χρήση πήκτωμα πολυακρυλαμιδίου χρησιμοποιείται για τον προσδιορισμό της ποσότητας κάθε τύπου.