Ano ang polyacrylamide gel?

Ang polyacrylamide gel ay isang solusyon na karaniwang ginagamit sa electrophoresis, ang proseso ng paghihiwalay ng iba't ibang laki ng mga molekula o mga particle sa pamamagitan ng pagpasa sa kanila sa pamamagitan ng isang gel at pag -apply ng elektrikal na kasalukuyang.Mayroong iba't ibang mga recipe para sa polyacrylamide gel, ngunit karaniwang naglalaman ito ng acrylamide, tubig, isang buffer, ammonium persulfate (APS), at tetramethylethylenediamine (temed).Ang gel na ito ay gumaganap bilang isang matrix na naghihiwalay sa mga compound batay sa kanilang singil at laki;Ang mas acrylamide sa solusyon ng gel, ang mas mahusay na paghihiwalay ng mas maliit na mga molekula.Karaniwan ang gel na ito ay ginagamit para sa paghihiwalay ng protina at DNA.

Sa electrophoresis, ang isang de -koryenteng patlang ay nagiging sanhi ng mga sisingilin na mga particle na lumipat sa isang gel, na gumaganap tulad ng isang salaan upang maging sanhi ng paghiwalayin ang iba't ibang laki ng mga particle.Ang gel ay sumisipsip ng anumang init na ginawa mula sa elektrikal na kasalukuyang.Ang polyacrylamide gel ay karaniwang ginagamit sa mga pamamaraang ito, ngunit ang agarose, ang isa pang kemikal na lumilikha ng isang katulad na gel, ay maaari ring magamit.Kapag pinaghahalo ang gel, ang acrylamide ay hindi nag -iisa, nangangahulugang nananatili itong solong molekula.Ang pagdaragdag ng iba pang mga kemikal na nagtataguyod ng pagbubuklod, tulad ng TEMED, ay nagiging sanhi ng mga molekula na mag -link nang magkasama na bumubuo ng mahabang kadena at mdash;ang poly na bahagi ng polyacrylamide.

Ang pangunahing bentahe ng polyacrylamide gel ay ang bilang ng mga bono ng link at tigas ay maaaring kontrolin batay sa paunang halaga ng acrylamide at temed idinagdag.Ang isang pangunahing kadahilanan sa konsentrasyon ng acrylamide ay ang laki ng molekula na nasuri.Ang mas maliit na mga compound na pinaghiwalay, mas kinakailangan ang acrylamide;Napakaliit na mga particle ay pinaghiwalay gamit ang pinakamataas na konsentrasyon, 15 porsyento.

Ang acrylamide ay gumagana sa pamamagitan ng pagkontrol sa dami ng alitan sa gel;Ang tigas ng gel ay tumutukoy sa dami ng alitan.Ang mga compound na malaki ay lilipat sa gel nang mas mabagal dahil natural na mas friction o pagtutol dahil sa kanilang laki.Ang mas maliit na mga compound ay gumagalaw nang mas mabilis, dahil may mas kaunting alitan.Upang maiwasan ang mga maliliit na compound mula sa paglipat ng gel, mas maraming acrylamide ang idinagdag upang lumikha ng mas maraming alitan.Ang mga piraso ng DNA ay hihiwalay ng kasing liit ng isang nucleotide, ang mga compound na bumubuo sa bawat strand.Upang malaman kung aling mga piraso ang tumutukoy sa mga tiyak na sukat, ang isang pamantayan na naglalaman ng mga fragment ng isang kilalang laki ay karaniwang tumatakbo kasama ang mga sample.Ang mga piraso ng DNA ay pagkatapos ay inihambing sa pamantayan, at ang laki ng strand ay tinutukoy.

Ang isang katulad na pamamaraan ay ginagamit upang matukoy ang laki ng mga protina, kadalasan ang mga nasa dugo.Ang dugo ay naglalaman ng dalawang pangunahing uri ng protina: globulin, isang malaking laki ng protina, at serum albumin, isang napakaliit, negatibong sisingilin na protina.Ang paghihiwalay gamit ang polyacrylamide gel ay ginagamit upang matukoy ang dami ng bawat uri.