Apa itu gel poliakrilamida?

Gel poliakrilamida adalah larutan yang biasa digunakan dalam elektroforesis, proses memisahkan berbagai molekul atau partikel berukuran berbeda dengan melewatkannya melalui gel dan menerapkan arus listrik.Ada berbagai resep untuk gel poliakrilamida, tetapi biasanya mengandung akrilamida, air, buffer, ammonium persulfate (APS), dan tetramethylethylenediamine (TEMED).Gel ini berfungsi sebagai matriks yang memisahkan senyawa berdasarkan muatan dan ukurannya;Semakin banyak akrilamida dalam larutan gel, semakin baik pemisahan molekul yang lebih kecil.Biasanya gel ini digunakan untuk pemisahan protein dan DNA.

Dalam elektroforesis, medan listrik menyebabkan partikel bermuatan bergerak melalui gel, yang berfungsi seperti saringan untuk menyebabkan partikel berukuran berbeda terpisah.Gel akan menyerap panas yang dihasilkan dari arus listrik.Gel poliakrilamida umumnya digunakan dalam prosedur ini, tetapi agarosa, bahan kimia lain yang menciptakan gel yang sama, juga dapat digunakan.

Gel dapat dibuat dari berbagai konsentrasi, dengan jumlah akrilamida mulai dari sekitar 6% hingga 15%.Saat mencampur gel, akrilamida tidak terpolimerisasi, artinya tetap sebagai molekul tunggal.Penambahan bahan kimia lain yang mempromosikan pengikatan, seperti Temped, menyebabkan molekul menghubungkan bersama -sama membentuk rantai panjang mdash;bagian poli poliakrilamida.

Keuntungan utama dari gel poliakrilamida adalah bahwa jumlah ikatan dan kekerasan hubungan dapat dikontrol berdasarkan jumlah awal akrilamida dan ditambahkan Temped.Faktor utama dalam konsentrasi akrilamida adalah ukuran molekul yang dianalisis.Semakin kecil senyawa yang dipisahkan, semakin banyak akrilamida;Partikel yang sangat kecil dipisahkan menggunakan konsentrasi tertinggi, 15 persen.

Akrilamida bekerja dengan mengendalikan jumlah gesekan dalam gel;Kekerasan gel menentukan jumlah gesekan.Senyawa yang besar akan bergerak melalui gel lebih lambat karena secara alami ada lebih banyak gesekan atau resistensi karena ukurannya.Senyawa yang lebih kecil bergerak lebih cepat, karena ada lebih sedikit gesekan.Untuk mencegah senyawa kecil bergerak dari gel, lebih banyak akrilamida ditambahkan untuk menciptakan lebih banyak gesekan.

DNA poliacrylamide Gel digunakan untuk memisahkan untaian DNA dengan panjang yang berbeda.Potongan DNA akan terpisah hanya dengan satu nukleotida, senyawa yang membentuk setiap untai.Untuk mengetahui potongan mana yang mengacu pada ukuran spesifik, standar yang berisi fragmen dengan ukuran yang diketahui biasanya dijalankan bersama dengan sampel.Potongan DNA kemudian dibandingkan dengan standar, dan ukuran untai ditentukan.

Prosedur serupa digunakan untuk menentukan ukuran protein, paling sering dalam darah.Darah mengandung dua jenis protein utama: globulin, protein berukuran besar, dan albumin serum, protein yang sangat kecil, bermuatan negatif.Pemisahan menggunakan gel poliakrilamida digunakan untuk menentukan jumlah masing -masing jenis.