Gel polyacrylamide là gì?

Gel gel polyacrylamide là một dung dịch thường được sử dụng trong điện di, quá trình tách ra các phân tử hoặc hạt có kích thước khác nhau bằng cách truyền chúng qua gel và áp dụng dòng điện.Có nhiều công thức khác nhau cho gel polyacrylamide, nhưng nó thường chứa acrylamide, nước, dung dịch đệm, amoni persulfate (APS) và tetramethylethylenediamine (Temed).Gel này hoạt động như một ma trận phân tách các hợp chất dựa trên điện tích và kích thước của chúng;Càng nhiều acrylamide trong dung dịch gel, sự phân tách tốt hơn của các phân tử nhỏ hơn.Thông thường gel này được sử dụng để tách protein và DNA.Trong điện di, một điện trường làm cho các hạt tích điện di chuyển qua gel, có chức năng giống như một cái rây để làm cho các hạt có kích thước khác nhau tách biệt.Gel sẽ hấp thụ bất kỳ nhiệt nào được sản xuất từ dòng điện.Gel polyacrylamide thường được sử dụng trong các quy trình này, nhưng agarose, một hóa chất khác tạo ra một loại gel tương tự, cũng có thể được sử dụng. Gels có thể được tạo ra với nồng độ khác nhau, với lượng acrylamide từ khoảng 6% đến 15%.Khi trộn gel, acrylamide không được hội tụ, có nghĩa là nó vẫn là các phân tử đơn.Việc bổ sung các hóa chất khác thúc đẩy liên kết, chẳng hạn như Temed, khiến các phân tử liên kết với nhau hình thành chuỗi dài mdash;Phần poly của polyacrylamide.

Ưu điểm chính của gel polyacrylamide là số lượng liên kết liên kết và độ cứng có thể được kiểm soát dựa trên lượng acrylamide ban đầu và được thêm vào.Một yếu tố chính trong nồng độ acrylamide là kích thước của phân tử được phân tích.Các hợp chất được tách ra càng nhỏ, càng cần nhiều acrylamide;Các hạt rất nhỏ được tách ra bằng cách sử dụng nồng độ cao nhất, 15 phần trăm.

acrylamide hoạt động bằng cách kiểm soát lượng ma sát trong gel;Độ cứng của gel xác định lượng ma sát.Các hợp chất lớn sẽ di chuyển qua gel chậm hơn vì tự nhiên có nhiều ma sát hoặc điện trở hơn vì kích thước của chúng.Các hợp chất nhỏ hơn di chuyển nhanh hơn, vì có ít ma sát hơn.Để ngăn chặn các hợp chất nhỏ di chuyển ra khỏi gel, nhiều acrylamide được thêm vào để tạo ra nhiều ma sát hơn. Gel DNA polyacrylamide được sử dụng để tách các chuỗi DNA có chiều dài khác nhau.Các mảnh DNA sẽ tách ra chỉ bằng một nucleotide, các hợp chất tạo nên từng sợi.Để biết các mảnh nào đề cập đến các kích thước cụ thể, một tiêu chuẩn chứa các đoạn có kích thước đã biết thường được chạy cùng với các mẫu.Các mảnh DNA sau đó được so sánh với tiêu chuẩn và kích thước của chuỗi được xác định.Một quy trình tương tự được sử dụng để xác định kích thước của protein, thường là những người trong máu.Máu chứa hai loại protein chính: globulin, protein có kích thước lớn và albumin huyết thanh, một protein rất nhỏ, tích điện âm.Tách sử dụng gel polyacrylamide được sử dụng để xác định số lượng của từng loại.