Ποιο είναι το κηλίδωμα Western;

Ένα στύπωμα Western είναι μια τεχνική εργαστηριακής ανάλυσης που χρησιμοποιείται για την απομόνωση των πρωτεϊνών.Μπορεί να χρησιμοποιηθεί στη διάγνωση ορισμένων ασθενειών, αλλά και στην έρευνα για διάφορες πρωτεΐνες και διαδικασίες.Φημιασμένα, το στύπωμα Western συνδέεται με τη διάγνωση της λοίμωξης από τον ιό HIV, αλλά μπορεί επίσης να χρησιμοποιηθεί για να αναζητήσει ίχνη βόειου σπογγώδους εγκεφαλίτιδας (BSE) και νόσου Lyme.Τα δείγματα που αποστέλλονται για δοκιμή με ένα πρωτόκολλο Western Blot μπορεί να επιστρέψει τα αποτελέσματα σε λίγες ημέρες έως αρκετές εβδομάδες, ανάλογα με την ικανότητα του εργαστηρίου και το επείγον.Τοποθετήστε μέσω ηλεκτροφόρησης έτσι ώστε οι πρωτεΐνες να διαχωριστούν κατά μήκος.Μια λωρίδα του πηκτώματος ηλεκτροφόρησης με απομονωμένες πρωτεΐνες του μήκους στόχου μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τη μεταφορά των πρωτεϊνών σε ένα υπόστρωμα νιτροκυτταρίνης για το επόμενο στάδιο της δοκιμής.Κατά τη διάρκεια αυτού του σταδίου, ένα αντίσωμα εισάγεται στο δείγμα, με στόχο την επισήμανση των πρωτεϊνών με αντιγόνα τα οποία το αντισωμένο κλειδώνει σε.Στην περίπτωση της δοκιμής για ασθένεια, η παρουσία αντιδραστικής πρωτεΐνης δείχνει ότι το δείγμα έχει δοκιμαστεί θετικά.Οι κηλίδες Western επιστρέφουν σπάνια ψευδώς θετικά, αν και μπορεί να συμβεί μερικές φορές, και μπορεί επίσης να επιστρέψουν ψευδώς αρνητικά, στα οποία ένα άτομο έχει στην πραγματικότητα μια ασθένεια, αλλά δεν εμφανίζεται σε δοκιμές Western blot.Αυτό μπορεί να είναι ιδιαίτερα κοινό σε περιπτώσεις που ο παράγοντας που προκαλεί ασθένεια δεν έχει αρχίσει ακόμη να αναπαράγει. "Οι ερευνητές μπορούν να χρησιμοποιήσουν τα αποτελέσματα για να εντοπίσουν συγκεκριμένες πρωτεΐνες που παρακολουθούν και για διάφορους άλλους σκοπούς.Η κατανόηση του τρόπου με τον οποίο οι λειτουργίες του πρωτοκόλλου Western είναι μια σημαντική δεξιότητα για ορισμένους ερευνητές και τεχνικούς εργαστηρίων, καθώς πρέπει να μπορούν να επιστρέψουν αξιόπιστα και αξιόπιστα αποτελέσματα χρησιμοποιώντας αυτή τη μέθοδο.Εργαστηριακές δεξιότητες, συμπεριλαμβανομένης της εκμάθησης του τρόπου χειρισμού περίπλοκων ή κακών δειγμάτων και πώς να αποφευχθεί η μόλυνση κατά τη διάρκεια της διαδικασίας, έτσι ώστε τα αποτελέσματα της δοκιμής να είναι γνωστό ότι είναι αληθινά.

Αυτή η τεχνική είναι μερικές φορές γνωστή ως ανοσοστυπώματος, επειδή ουσιαστικά οι επιθυμητές πρωτεΐνες είναι"Κοστιδές" με αντισώματα έτσι ώστε να εμφανιστούν.Αυτή η δοκιμή μπορεί να χρησιμοποιηθεί για να αναζητήσει πρωτεΐνες σε όλα τα ζώα, όχι μόνο στους ανθρώπους, με τους κτηνιάτρους που συχνά χρησιμοποιούν τη δοκιμή στυπώματος Western για να προσδιορίσουν εάν ένα κοπάδι αγελάδων έχει μολυνθεί ή εκτίθεται στη ΣΕΒ