¿Qué es un microscopio confocal?
Un microscopio confocal es un tipo particular de microscopio fluorescente utilizado para obtener imágenes 2D y 3D de alta calidad. Con un microscopio fluorescente básico (de campo ancho), la luz de una longitud de onda particular, se brilla en un espécimen, y la muestra absorbe parte de esa luz, y refleja el resto en una longitud de onda más larga. La luz de longitud de onda más larga pasa a través de un espejo dicroico, que permite que pase la luz de longitud de onda original más larga, pero no la luz original (más corta). La persona que ve la muestra solo ve la luz que ha pasado por el espejo dicroico. Los microscopios fluorescentes básicos capturan tanto la luz en el enfoque como la luz fuera de enfoque, lo que funciona bien para muestras grandes donde no se requiere una resolución muy alta. No funciona tan bien para ver detalles finos. Se necesita un microscopio confocal para capturar imágenes fluorescentes de alta resolución.
El microscopio confocal utiliza un agujero de alfiler para rechazar la luz fuera de foco. En lugar de que la luz pase solo a través de un dichRoic Mirror, la luz se pasa a través de un espejo dicroico y un agujero de ras de pie, lo que significa que la persona que ve la muestra solo ve un punto de la muestra. Para ver una muestra completa, los espejos móviles escanean la luz en un plano rectangular de la muestra, y una computadora recoge la luz emitida a medida que se escanea la muestra. Una exploración completa dará como resultado una porción óptica, o sección transversal, de la muestra. Este tipo de microscopía se llama microscopía de escaneo láser confocal, en parte porque un láser se usa como fuente de luz.
Para crear una imagen 3D, se realizan varios escaneos, creando varios "rebanadas" de la muestra, y una computadora combina cada corte para crear una imagen tridimensional. El microscopio se puede programar para variar el espacio entre los cortes, dependiendo de la imagen de la imagen 3D nítida que el usuario desea obtener. El microscopio también puede variar la velocidad a la que escanea una imagen,con un escaneo lento dando una resolución más alta que el escaneo rápido.
El microscopio confocal se ha convertido en una pieza de equipo muy comúnmente utilizada en muchos laboratorios de ciencia de la vida. Son caros y algo grandes, y a menudo tienen habitaciones dedicadas a su uso, porque la habitación debe estar oscura para obtener una buena imagen fluorescente. Aunque los microscopios confocales se usan más comúnmente para ver células y estructuras dentro de las células, se pueden usar para obtener una imagen de cualquier muestra fluorescente tridimensional y, a veces, se usan para ver materiales semiconductores.