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2Dゲル電気泳動とは何ですか?

二次元(2D)ゲル電気泳動は、科学者が2つの異なる軸に沿ってタンパク質のバンドを最初に分離することにより、タンパク質混合物を分解して分析するために使用する方法です。これは、タンパク質の複雑なまたは厚い混合物を扱うときに最もよく使用される手法であり、多くの場合、タンパク質の重複サイズのサイズがあります。2Dゲル電気泳動は、1次元の方法が2つの異なるタンパク質特性に基づいてタンパク質の分離を使用し、一方、一次元ゲル電気泳動は通常、タンパク質サイズなどの単一特性に基づいてタンパク質を分離するため、1次元ゲル電気泳動とは異なります。DNAなどの多くの生物学的分子に電荷があるという事実を利用することにより、分子を分離するために研究で使用されます。この事実は、多孔質のイオンゲルに電圧勾配を適用することにより、アガロースのような多孔質基質を介してサイズによって分離できるため、科学者の利点に使用できます。時間が経つにつれて、分子はこのゲルを通過し、分子の自然電荷とは反対の電荷に向かって通過します。小分子と帯電した分子は両方とも、帯電した大きな分子またはタンパク質よりも速く移動します。2Dゲル電気泳動では、単一の特性を介してタンパク質を分離した後、勾配を作成した後、ゲルを横に回して、2番目の特性に基づいて以前に生じるバンドを分離することができます。タンパク質凝集体を単一成分タンパク質に分離できる特性。タンパク質質量は、2Dゲル電気泳動のタンパク質を分離するために使用されるもう1つの一般的な特性です。タンパク質が一次元ゲル電気泳動で単一の車線を通ってゲルで実行された後、ゲルは遠心分離機で紡がれ、より小さなタンパク質よりも速いタンパク質をより速く引き下げます。プルの方向は、電圧勾配を介した電荷への引力のために、タンパク質がゲルを介して描かれた方向に垂直です。タグ付け。タンパク質が他の分子でタグ付けされている場合、特徴的な質量に基づくタンパク質分離も使用されます。この手法は、タグ付きタンパク質がタグなしタンパク質よりもゲルを介してより容易に落ちるため、これらのタンパク質複合体で使用できます。これらのタイプのゲルは、ウエスタンブロットやその他のタンパク質サイズベースのアッセイで使用されます。アガロースは、DNAセグメントの分離に頻繁に使用されます。