Was sind die Schritte im ELISA -Verfahren?

Das ELISA -Verfahren beginnt in der Klinik, wobei eine Blutprobe vom Patienten entnommen wird. Eine Reihe von Schritten wird dann mit dem ELISA -Testkit im Labor befolgt. Der Test erfasst das Vorhandensein von Antikörpern oder Antigenen gegen eine Krankheit wie HIV im Blut. Die Schritte umfassen die Zugabe verschiedener Substanzen und das Waschen und die Ergebnisse werden im Allgemeinen durch eine Farbänderung gemessen. Es ist am bekanntesten als diagnostischer Test für HIV. Die Testplatte besteht normalerweise aus 96 kleinen Brunnen, in die ein bestimmtes Antigen immobilisiert ist. Wenn der Antikörper in der Serumprobe vorhanden ist, wird an das Antigen gebunden, wodurch der Nachweis über die verschiedenen Schritte des ELISA -Verfahrens ermöglicht wird.

Der erste Schritt im ELISA -Verfahren besteht darin, eine Probe vom Patienten zu erhalten. Dies geschieht von einer Krankenschwester unter sterilen Bedingungen. Das Blut wird normalerweise aus einer Ader genommenim Arm oder Hand. Ein Tourniquet wird auf den Arm gelegt, um die Vene zu schwellen und das Verfahren zu erleichtern, und die Haut wird gereinigt, wo die Nadel eingefügt wird. Ein kleiner Schwanz kann zu spüren sein, wenn die Nadel hineingeht und das Blut in einem sterilen Röhrchen gesammelt wird.

Nachdem die Blutprobe genommen wurde, wird sie in das Labor übertragen, in dem der Rest des ELISA -Verfahrens von einem Labortechniker durchgeführt wird. Die Blutprobe wird zuerst in die Brunnen der ELISA -Platte hinzugefügt. Wenn der spezifische Antikörper vorhanden ist, bindet er an das Antigen. Die Platte wird dann mit einem Puffer gewaschen, um ungebundene Antikörper zu entfernen.

Anschließend wird ein zweiter Antikörper zugegeben, der an dem Antikörper-Antigen-Komplex gebunden wird, ein zweiter Antikörper, der normalerweise tierisch ist, ein Enzym, das an ihn gebunden ist. Die Platte wird erneut gewaschen, um Überschuss zu entfernen. Das Enzym ist farbreaktiv, wenn am Ende des ELISA-Verfahrens ein Substrat hinzugefügt wird. Es ist dasE Messung des Farbänderungsgrades, der das Ergebnis ergibt.

Das ELISA -Verfahren muss sorgfältig befolgt werden, um falsche Ergebnisse zu vermeiden. In den meisten ELISA -Platten wird eine positive und negative Kontrolle enthalten, um solche falschen Ergebnisse zu minimieren. Beim Testen auf HIV wird ein positives Ergebnis normalerweise von einem zweiten, bestätigenden, Test, häufig von einem anderen Typ, wie einem Western Blot, verfolgt.