Qu'est-ce que le protocole ELISA?

Un test immunosorbant lié à l'enzyme (ELISA) est un test courant utilisé en immunologie pour détecter les antigènes ou les anticorps.Les antigènes provoquent une réaction du système immunitaire mdash;En d'autres termes, ils provoquent des maladies.ELISA est utilisé pour détecter de nombreux antigènes bactériens et viraux, notamment le virus de l'immunodéficience humaine (VIH), le paludisme, le choléra, la rougeole et les oreillons.Un protocole ELISA légèrement différent peut être utilisé pour détecter les anticorps par rapport à ces agents pathogènes et à bien d'autres.Un protocole ELISA est la procédure étape par étape pour effectuer un ELISA spécifique.

Bien que le protocole ELISA varie légèrement, selon le type d'ELISA effectué, le concept de base est le même pour tous.ELISA dépend des anticorps liés à l'enzyme, également appelés

Antiglobulines .Une molécule de signal attachée à ces antiglobulines provoque un substrat ajouté pendant le test pour changer la couleur, si l'antigène ou l'anticorps souhaité est présent.La quantité d'antigène ou d'anticorps présente est proportionnelle à la quantité de changement de couleur, qui peut être mesurée avec un lecteur de plaques électroniques.

Il existe trois principaux types d'ELISA.Une

directe ELISA est généralement utilisée pour détecter les antigènes plutôt que les anticorps.Il s'agit du protocole ELISA le plus simple, car l'anticorps lié à l'enzyme se lie directement à l'antigène souhaité.Un substrat est ensuite ajouté pour déterminer la quantité d'antigène présent.

an

indirect eLISA est utilisé pour détecter les anticorps, tandis qu'un autre type d'Elisa mdash indirect;appelé un sandwich Elisa mdash;Peut être utilisé pour détecter les antigènes.Un protocole Sandwich ELISA nécessite deux anticorps, appelés anticorps de capture et de détection, pour se lier à l'antigène souhaité.Une antiglobuline est ajoutée, qui se lie à l'anticorps de détection, et le substrat est ajouté.L'ELISA indirecte suit un protocole similaire, mais utilise un antigène de capture plutôt qu'un anticorps de capture afin de détecter l'anticorps souhaité.

Competitive ELISA est souvent utilisé pour détecter les antigènes qui sont présents dans de faibles concentrations, car c'est un trèstest sensible.Contrairement aux autres protocoles ELISA, ELISA compétitive utilise un antigène lié à l'enzyme au lieu d'un anticorps et une méthode de quantification légèrement différente.Dans ce document, l'échantillon contenant l'antigène à détecter et l'antigène lié à l'enzyme sont tous deux ajoutés à un anticorps, et les deux antigènes rivalisent pour les sites de liaison aux anticorps.Lorsque le substrat est ajouté, le changement de couleur est plus élevé, avec un rapport plus élevé d'antigènes liés en enzyme liés aux antigènes d'échantillon liés.Cela signifie qu'un changement de couleur plus élevé est détecté à des concentrations plus faibles de l'antigène de l'échantillon, ce qui rend cette méthode si sensible.