Apa itu antibodi biotin?
Bertentangan dengan apa yang pertama kali dipikirkan orang, antibodi biotin bukanlah suatu zat yang dibesarkan terhadap biotin.Sebaliknya, antibodi biotin adalah antibodi yang telah dikonjugasikan hingga biotin.Biotin sangat berikatan dengan ligand mdash;Avidin mdash;yang pada gilirannya, dapat terkonjugasi dengan molekul terdeteksi cahaya seperti fluorofor.Biotin dan Avidin membentuk salah satu ikatan kovalen yang relevan secara biologis yang diketahui, membuat ligan/reseptor terkonjugasi biotin dan avidin terkonjugasi sangat berguna dalam studi ilmiah.
Biotin adalah vitamin B-kompleks mdash;Vitamin B7.Ini adalah molekul kecil sehingga beberapa molekul biotin dapat dikonjugasikan dengan antibodi monoklonal atau poliklonal tunggal.Fakta bahwa biotin juga larut dalam air memungkinkan fleksibilitas yang lebih besar dalam sistem buffer daripada jika tidak larut.Untuk spesifisitas yang lebih besar, konjugasi antibodi monoklonal untuk biotin sering direkomendasikan pada konjugasi antibodi poliklonal.Molekul biotin dapat secara langsung terikat dengan antibodi yang menarik, atau dapat dihubungkan melalui ekor molekuler untuk memungkinkan lebih banyak kebebasan bergerak.
Ligan biotin avidin ditemukan dalam albumin telur.Ini bisa dibuat dengan murah dan mudah diisolasi.Beberapa molekul avidin akan mengikat ke setiap reseptor biotin, memperkuat sinyal deteksi antibodi tunggal.Ketika antibodi biotin melekat pada antigen yang menarik, seorang eksperimen kemudian dapat mengekspos kompleks ke avidin terkonjugasi ke fluorofor, membuat kompleks terdeteksi.Melalui pencitraan fluorescent, antibodi biotin dan ligan terkonjugasi avidin dapat dideteksi dengan mikroskop cahaya, dan antigen yang menarik dapat dipelajari in situ .Solusi umum untuk deteksi antigen, ada alternatif yang masih menggunakan kompleks biotin/avidin.Mengikat biotin ke ligan seperti neurotoksin dapat menguntungkan dalam mendeteksi penempatan reseptor neuron yang dipengaruhi oleh neurotoksin yang dimaksud.Dimungkinkan juga untuk mengkonjugasikan biotin ke urutan nukleotida seperti asam ribonukleat messenger (mRNA) untuk menemukan di mana urutan nukleotida ini diterjemahkan ke dalam protein atau untuk mendeteksi regulasi mRNA seluler.Meskipun produksi antibodi biotinilasi berada dalam kemampuan banyak eksperimen.Protokol dapat ditemukan secara online menunjukkan metode biotinilasi antibodi, meskipun paling mudah diikuti protokol secara langsung menghubungkan biotin ke antibodi daripada menyarankan bagaimana interkalasi spacer molekuler.Spacer molekuler antara biotin dan antibodi yang terkait memungkinkan jarak yang lebih besar untuk mengekspos lebih banyak molekul ke situs pengikatan, dan antibodi biotin ini biasanya dibeli daripada dibuat.