Apa itu plasmid?

Dalam banyak bakteri yang berbeda, potongan DNA melingkar kecil dapat ditemukan dalam sitoplasma.Lingkaran DNA ini dikenal sebagai plasmid, dan terpisah dari DNA kromosom, atau DNA yang membawa gen untuk sel bakteri.Beberapa salinan plasmid sering hadir pada satu waktu di sel bakteri.Plasmid memainkan peran yang sangat penting dalam rekayasa genetika, terutama dalam kloning gen.

Ketika gen dikloning, proses biasanya terjadi dalam bakteri.Untuk mendapatkan gen yang akan dikloning ke dalam bakteri, vektor diperlukan.Plasmid adalah apa yang digunakan sebagai vektor, karena dapat dengan mudah berlalu dari satu sel ke sel lainnya.

Ada sejumlah langkah yang terlibat dalam kloning gen sebelum memasukkan plasmid ke dalam sel inang.Pertama, gen yang akan disalin harus diisolasi, seperti halnya plasmid yang akan digunakan sebagai vektor.Setelah ini selesai, gen harus dimasukkan ke dalam DNA plasmid.Plasmid kemudian dimasukkan ke dalam sel inang bakteri untuk replikasi.

Untuk mengisolasi plasmid dari sel bakteri, sel -sel harus awalnya diobati dengan enzim untuk memecah dinding sel bakteri.DNA kromosom yang lebih besar adalah terpisah dari plasmid yang lebih kecil menggunakan centrifuge.DNA plasmid yang terisolasi sekarang siap untuk dimasukkan ke dalamnya.

plasmid terdiri dari lingkaran DNA untai ganda.Untuk memasukkan gen yang diinginkan, DNA plasmid dipotong dengan enzim restriksi.Enzim ini hanya memotong DNA pada urutan nukleotida yang sangat spesifik.Setelah DNA plasmid telah dipotong, urutan penghubung ditambahkan ke ujung longgar yang berkorelasi dengan ujung gen yang akan dimasukkan.Ini memastikan bahwa gen tersebut cocok dengan plasmid.

Setelah gen telah dimasukkan ke dalam plasmid, sekarang siap untuk dimasukkan ke dalam bakteri yang hidup.Bakteri mereplikasi plasmid mereka sehingga satu sel dapat berisi banyak salinan.Mungkin ada hingga 200 salinan plasmid tunggal dalam satu bakteri.Jika plasmid dimasukkan ke dalam banyak sel bakteri, banyak salinan gen dapat diproduksi relatif cepat, terutama ketika sel bakteri bereplikasi setiap 20 menit.

Ini adalah proses yang digunakan untuk menciptakan insulin manusia.Pengkodean gen untuk insulin diisolasi dan dimasukkan ke dalam plasmid.Semua plasmid yang mengandung gen insulin kemudian dimasukkan ke dalam bakteri, di mana mereka direplikasi.Bakteri kemudian terus mereplikasi diri mereka sendiri, sehingga jutaan sel yang mengandung gen insulin dapat dibuat dalam waktu yang sangat singkat.Gen kloning ini sekarang menyediakan sumber yang dapat diandalkan untuk insulin manusia.