Was ist 2D -Gelelektrophorese?
Die zweidimensionale (2D) Gelelektrophorese ist eine Methode, die Wissenschaftler verwenden, um Proteinmischungen auseinanderzunehmen und zu analysieren, indem zuerst Banden von Proteinen entlang von zwei verschiedenen Achsen getrennt werden.Es ist eine Technik, die am häufigsten beim Umgang mit komplizierten oder dicken Proteinenmischungen verwendet wird, häufig mit überlappenden Größen von Proteinen.2D-Gelelektrophorese unterscheidetWird in Forschungen verwendet, um Moleküle zu trennen, indem sie die Tatsache nutzen, dass viele biologische Moleküle wie DNA eine elektrische Ladung haben.Diese Tatsache kann zum Vorteil der Wissenschaftler verwendet werden, da geladene Moleküle durch die Größe durch ein poröses Substrat wie Agarose getrennt werden können, indem ein Spannungsgradienten über ein poröses ionisches Gel angewendet wird.Im Laufe der Zeit gehen Moleküle durch dieses Gel in Richtung der Ladung, die der natürlichen Ladung des Moleküls entgegengesetzt ist.Kleine Moleküle und stark geladene Moleküle bewegen sich schneller als große Moleküle oder Proteine, die schwach aufgeladen sind.Bei 2D -Gel -Elektrophorese kann nach dem Trennen von Proteinen durch ein einzelnes Merkmal ein GEL seitlich seitwärts gedreht werden, um die zuvor resultierenden Banden basierend auf einer zweiten Eigenschaft zu trennen.Charakteristik, durch das Proteinaggregate in Einzelkomponentenproteine unterteilt werden können.Proteinmasse ist ein weiteres häufiges Merkmal, das zur Trennung von Proteinen in der 2D -Gelelektrophorese verwendet wird.Nachdem Proteine auf einem Gel durch eine eindimensionale Gelelektrophorese durch eine einzelne Spur geführt werden, kann dieses Gel in einer Zentrifuge gedreht werden, wodurch die schwereren Proteine schneller als die kleineren, weniger massiven Proteine nach unten ziehen.Die Richtung des Zuges ist senkrecht zur Richtung, in die die Proteine durch das Gel durch Anziehung einer elektrischen Ladung durch einen Spannungsgradienten durch das Gel gezogen wurden.Tagging.Proteintrennung basierend auf einer charakteristischen Masse wird auch verwendet, wenn Proteine mit anderen Molekülen markiert werden.Diese Technik kann mit diesen Proteinkomplexen angewendet werden, da die markierten Proteine leichter durch ein Gel fallen als unagelte Proteine.
, während viele Trenngele in Laboratorien aus Agarose, Proteintrennung durch 2D -Gelelektrophorese, an Polyacrylamid -Gelen bestehen.Diese Arten von Gelen werden in Western Blots und anderen Assays auf Proteingröße verwendet.Agarose wird häufiger zur Trennung von DNA -Segmenten verwendet.