Mi az a 2D gél elektroforézis?

A kétdimenziós (2D) gélelektroforézis olyan módszer, amelyet a tudósok használnak a fehérjekeverékek szétválasztására és elemzésére azáltal, hogy a fehérjék sávjait két különböző tengely mentén választják el.Ez egy olyan technika, amelyet leggyakrabban használnak a fehérjék bonyolult vagy vastag keverékeivel, gyakran átfedő méretű fehérjékkel.A 2D gélelektroforézis különbözik az egydimenziós gélelektroforézistől, mivel az előző módszer két különböző fehérje jellemző alapján alkalmazza a fehérjék elválasztását, míg az egydimenziós gélelektroforézis általában egyetlen jellemző, például a fehérje méret alapján választja el a fehérjéket.

A gélelektroforézis gyakran fordul előA kutatásban a molekulák elválasztására használják annak felhasználásával, hogy sok biológiai molekula, például a DNS, elektromos töltéssel rendelkezik.Ez a tény felhasználható a tudósok előnyeire, mivel a töltött molekulákat méret szerint lehet elválasztani egy porózus szubsztráton keresztül, mint agaróz, feszültséggradiens alkalmazásával egy porózus, ionos gélen.Az idő múlásával a molekulák áthaladnak ezen a gélen, a molekula természetes töltésével ellentétes töltés felé.A kis molekulák és az erősen töltött molekulák egyaránt gyorsabban mozognak, mint a gyengén töltött nagy molekulák vagy fehérjék.A 2D gélelektroforézisben, miután a fehérjéket egyetlen jellemzőn keresztül elválasztottuk, amely gradienst hoz létre, a gél oldalra fordítható, hogy elválaszthassa az előzőleg eredményezett sávokat egy második tulajdonság alapján.Jellemzője, hogy a fehérje aggregátumok elválaszthatók egyetlen komponens fehérjékre.A fehérjetömeg egy másik általános jellemző, amelyet a fehérjék elválasztására használnak a 2D gél elektroforézisben.Miután a fehérjéket egy gélen keresztül egyetlen sávon keresztül futtatják egydimenziós gélelektroforézisben, ezt a gélt ezután centrifugában lehet forgatni, és a nehezebb fehérjéket gyorsabban húzza le, mint a kisebb, kevésbé masszív fehérjék.A húzás iránya merőleges a fehérjék irányára a gélen keresztül, mivel egy feszültséggradiensen keresztül elektromos töltés vonzódott.címkézés.A fehérje elválasztását jellegzetes tömeg alapján is alkalmazzák, ha a fehérjéket más molekulákkal jelölik.Ez a technika alkalmazható ezekkel a fehérjekomplexekkel, mivel a címkézett fehérjék könnyebben esnek át egy gélen, mint a nem címkézett fehérjéken.Az ilyen típusú géleket Western blot-ban és más fehérje méretű vizsgálatokban használják.Az agarózot gyakrabban használják a DNS -szegmensek elválasztására.