Điện di gel 2D là gì?

Điện di gel hai chiều (2D) là một phương pháp các nhà khoa học sử dụng để tách và phân tích hỗn hợp protein bằng cách tách các dải protein dọc theo hai trục khác nhau.Đây là một kỹ thuật thường được sử dụng nhất khi xử lý các hỗn hợp protein phức tạp hoặc dày, thường với kích thước protein chồng chéo.Điện di gel 2D khác với điện di gel một chiều vì phương pháp trước đây sử dụng sự phân tách protein dựa trên hai đặc tính protein khác nhau, trong khi điện di gel một chiều thường tách protein dựa trên một đặc tính duy nhất, như kích thước protein.Được sử dụng trong nghiên cứu để tách các phân tử bằng cách sử dụng thực tế là nhiều phân tử sinh học, như DNA, có điện tích.Thực tế này có thể được sử dụng để lợi thế của các nhà khoa học vì các phân tử tích điện có thể được phân tách bằng kích thước thông qua chất nền xốp như agarose bằng cách áp dụng một gradient điện áp trên gel ion xốp.Theo thời gian, các phân tử sẽ đi qua gel này, hướng tới điện tích đối diện với điện tích tự nhiên của phân tử.Các phân tử nhỏ và các phân tử tích điện nặng đều di chuyển nhanh hơn các phân tử lớn hoặc protein được tích điện yếu.Trong điện di gel 2D, sau khi tách protein thông qua một đặc tính duy nhất, tạo ra độ dốc, sau đó gel có thể được xoay sang một bên để tách các dải kết quả trước đó dựa trên đặc tính thứ hai.Đặc tính theo đó các tập hợp protein có thể được tách thành các protein thành phần đơn.Khối lượng protein là một đặc điểm phổ biến khác được sử dụng để tách protein trong điện di gel 2D.Sau khi các protein được chạy trên gel thông qua một làn đường trong điện di gel một chiều, gel đó có thể được quay trong máy ly tâm, kéo các protein nặng hơn xuống nhanh hơn các protein nhỏ hơn, ít lớn hơn.Hướng của lực kéo vuông góc với hướng protein được rút qua gel do thu hút điện tích qua gradient điện áp.gắn thẻ.Tách protein dựa trên khối lượng đặc trưng cũng được sử dụng khi protein được gắn thẻ với các phân tử khác.Kỹ thuật này có thể được sử dụng với các phức hợp protein này vì các protein được gắn thẻ sẽ dễ dàng thông qua gel hơn so với protein không được gắn thẻ. Trong khi nhiều gel tách trong các phòng thí nghiệm được tạo ra từ agarose, tách protein bằng điện di gel 2D được thực hiện tốt nhất trên gel polyacrylamide.Những loại gel này được sử dụng trong các blots phương Tây và các xét nghiệm dựa trên kích thước protein khác.Agarose thường được sử dụng để phân tách các phân đoạn DNA.