Apa teknik hibridisasi in situ fluorescent?

Hibridisasi in situ fluoresen, juga dikenal sebagai hibridisasi fluoresensi in situ, lebih umum disebut sebagai ikan.Ini adalah teknik yang melibatkan penggunaan untaian pendek DNA yang diberi label dengan pewarna fluoresen untuk mendeteksi kelainan genetik.Ikan memungkinkan peneliti untuk memvisualisasikan kromosom, bagian kromosom, atau gen spesifik dengan cepat dan akurat.Ini sering digunakan untuk menentukan prognosis dan pengobatan untuk penyakit tertentu, khususnya kanker.

Ikan digunakan untuk menentukan apakah kromosom memiliki kelainan.Ini mungkin termasuk penghapusan kromosom, penataan ulang, atau translokasi, di mana dua kromosom telah mengganti segmen.Ikan juga memungkinkan peneliti untuk memvisualisasikan gen tertentu.Ini dapat menentukan apakah ada gen tertentu, di mana ia terletak pada kromosom, dan jika ada banyak salinan.Ini disebut pemetaan gen.

Riasan genetik seseorang terkandung dalam DNA mereka, yang terletak di inti semua sel mereka.DNA memiliki dua untaian yang saling melengkapi.Dengan kata lain, mereka memiliki molekul yang disebut pasangan basa yang cocok dengan persis.Gen adalah segmen DNA yang memiliki urutan pasangan basa tertentu dan terletak di area spesifik kromosom.Gen diwariskan dan menentukan bagaimana fungsi sel, tetapi mereka juga dapat menjadi bermutasi jika urutan pasangan basa DNA berubah.

Teknik hibridisasi in situ fluoresen mengambil keuntungan dari sifat gratis untai DNA.Penyelidik pertama membuat penyelidikan.Ini adalah untai DNA yang pendek dan tunggal yang gratis untuk urutan genetik yang dicari oleh peneliti.Probe kemudian diberi label atau melekat pada pewarna fluoresen.

Sel dari jaringan yang sakit, seperti biopsi tumor, biasanya membentuk sampel yang akan diperiksa oleh ikan.Sampel dipanaskan untuk mendenaturasi DNA dalam inti sel.Ini berarti bahwa untaian ganda DNA dalam sel sampel pecah untuk membentuk untaian tunggal.Probe ikan tertentu kemudian dihidridisasi dengan sampel.Dengan kata lain, untaian tunggal probe diperkenalkan dan menyatu dengan untai tunggal gratis dalam sel sampel yang terdenaturasi.

Menggunakan mikroskop fluorescent khusus, peneliti melihat sampel.Jika gen atau kromosom spesifik hadir dalam sel sampel, itu akan muncul sebagai cahaya fluoresen terhadap latar belakang yang lebih gelap.Para peneliti dapat dengan mudah melihat apakah gen tersebut ada atau tidak, dan jika ya, berapa banyak salinan gen di setiap sel.Jika peneliti mencari lokasi gen, ia dapat melihat di mana pada kromosom itu.Mikroskop cahaya biasa tidak dapat digunakan dengan ikan, karena pewarna fluorescent mengeluarkan tingkat cahaya yang sangat rendah.

Penggunaan hibridisasi DNA dengan probe pertama kali dilakukan pada 1960 -an;Namun, probe diberi label dengan zat radioaktif daripada yang fluorescent.Ini memiliki beberapa masalah.Zat radioaktif secara inheren tidak stabil, berbahaya, dan membutuhkan protokol khusus untuk dibuang.Ini juga membutuhkan waktu lama untuk mengukur sinyal radioaktif yang dipancarkan oleh probe hibridisasi.Teknik hibridisasi in situ fluoresen mengatasi sebagian besar hambatan ini.

Jika peneliti tahu gen apa yang mereka cari, ikan cepat dan akurat untuk menemukannya.Ikan juga dapat dilakukan bahkan jika sel tidak secara aktif membagi, dan memberikan informasi yang lebih spesifik tentang kelainan kromosom.Teknik yang lebih konvensional, seperti karotyping, cukup memberi tahu peneliti jumlah dan ukuran kromosom dalam sel.

Hibridisasi in situ fluorescent memang memiliki kelemahan.Karena kunci ikan adalah mengetahui urutan pasangan dasar dan/atau lokasi gen, itu tidak dapat digunakan sebagai alat penyaringan umum.Ini juga lebih mahal daripada teknik lain yang kurang spesifik dan mungkin tidak tersedia di semua laboratorium atau rumah sakit./p

Kelebihan dan kerugian dari hibridisasi neon in situ paling baik dijelaskan dengan contoh.Ikan secara rutin digunakan dalam diagnosis kanker payudara untuk menentukan apakah seorang pasien memiliki banyak salinan gen yang disebut HER2.Ini biasanya menunjukkan bentuk kanker payudara yang lebih agresif, dan bahwa pasien harus menerima obat tertentu sebagai bagian dari perawatan mereka.Ikan dapat digunakan untuk ini karena urutan pasangan dasar dan lokasi kromosom gen HER2 diketahui.Sebaliknya, ikan tidak dapat digunakan untuk menentukan gen atau gen yang tidak diketahui apa yang menyebabkan kanker payudara, atau untuk menyaring kanker payudara secara umum.