Kỹ thuật lai huỳnh quang trong tình huống là gì?

Hạng huỳnh quang trong lai tạo tại chỗ, còn được gọi là huỳnh quang trong lai tạo tại chỗ, thường được gọi là cá.Nó là một kỹ thuật liên quan đến việc sử dụng một chuỗi DNA ngắn được dán nhãn bằng thuốc nhuộm huỳnh quang để phát hiện các bất thường về di truyền.Cá cho phép các nhà điều tra hình dung nhiễm sắc thể, các phần của nhiễm sắc thể hoặc gen cụ thể một cách nhanh chóng và chính xác.Điều này thường được sử dụng để xác định tiên lượng và điều trị cho một số bệnh, đặc biệt là ung thư.

cá được sử dụng để xác định xem nhiễm sắc thể có bất thường hay không.Điều này có thể bao gồm xóa nhiễm sắc thể, sắp xếp lại hoặc dịch chuyển, trong đó hai nhiễm sắc thể đã chuyển đổi phân đoạn.Cá cũng cho phép các nhà điều tra hình dung các gen cụ thể.Nó có thể xác định nếu một gen nhất định có mặt, nơi nó nằm trên các nhiễm sắc thể và nếu có nhiều bản sao.Điều này được gọi là lập bản đồ gen.Trang điểm di truyền của một người được chứa trong DNA của họ, nằm trong hạt nhân của tất cả các tế bào của họ.DNA có hai chuỗi miễn phí cho nhau.Nói cách khác, chúng có các phân tử được gọi là các cặp cơ sở kết hợp chính xác với nhau.Các gen là các phân đoạn DNA có một chuỗi các cặp cơ sở cụ thể và được đặt trên các khu vực cụ thể của nhiễm sắc thể.Các gen được di truyền và xác định cách thức hoạt động của các tế bào, nhưng chúng cũng có thể bị đột biến nếu chuỗi các cặp cơ sở DNA thay đổi.

Kỹ thuật lai huỳnh quang trong tình huống tận dụng bản chất miễn phí của các chuỗi DNA.Các nhà điều tra đầu tiên tạo ra một cuộc thăm dò.Đây là một chuỗi DNA ngắn, đơn, miễn phí cho chuỗi di truyền mà các nhà điều tra đang tìm kiếm.Đầu dò sau đó được dán nhãn hoặc gắn vào thuốc nhuộm huỳnh quang. Các tế bào từ mô bị bệnh, chẳng hạn như sinh thiết khối u, thường tạo nên mẫu được kiểm tra bằng cá.Mẫu được làm nóng để biến tính DNA trong các hạt nhân của các tế bào.Điều này có nghĩa là các chuỗi DNA kép trong các tế bào mẫu bị phá vỡ để tạo thành các chuỗi đơn.Một đầu dò cá cụ thể sau đó được lai với mẫu.Nói cách khác, chuỗi đơn thăm dò được giới thiệu và hợp nhất với chuỗi đơn miễn phí trong các tế bào mẫu bị biến tính.Sử dụng kính hiển vi huỳnh quang đặc biệt, nhà nghiên cứu nhìn vào mẫu.Nếu gen hoặc nhiễm sắc thể cụ thể có trong các tế bào mẫu, nó sẽ xuất hiện dưới dạng ánh sáng huỳnh quang trên nền tối hơn.Các nhà nghiên cứu có thể dễ dàng xem liệu gen có mặt hay không, và nếu có, có bao nhiêu bản sao của gen trong mỗi tế bào.Nếu nhà nghiên cứu đang tìm kiếm vị trí của một gen, anh ta hoặc cô ta có thể thấy nó ở đâu trên nhiễm sắc thể.Một kính hiển vi ánh sáng thông thường không thể được sử dụng với cá, bởi vì thuốc nhuộm huỳnh quang phát ra một mức độ ánh sáng rất thấp.Sử dụng lai DNA với các đầu dò được thực hiện lần đầu tiên vào những năm 1960;Tuy nhiên, các đầu dò được dán nhãn với các chất phóng xạ thay vì huỳnh quang.Điều này đã có một số vấn đề.Các chất phóng xạ vốn đã không ổn định, nguy hiểm và yêu cầu các giao thức đặc biệt để xử lý.Cũng mất một thời gian dài để đo tín hiệu phóng xạ phát ra từ đầu dò lai.Kỹ thuật lai huỳnh quang trong tình huống vượt qua hầu hết các chướng ngại vật này.Nếu các nhà điều tra biết họ đang tìm kiếm gen nào, cá nhanh và chính xác trong việc tìm thấy nó.Cá cũng có thể được thực hiện ngay cả khi các tế bào không tích cực phân chia và nó cung cấp thông tin cụ thể hơn về sự bất thường trong nhiễm sắc thể.Nhiều kỹ thuật thông thường hơn, chẳng hạn như karotyping, chỉ cần nói với các nhà điều tra số lượng và kích thước của nhiễm sắc thể trong một tế bào.Hạng huỳnh quang trong lai tạo tại chỗ có nhược điểm.Vì chìa khóa của cá là biết trình tự cặp cơ sở và/hoặc vị trí của gen, nó không thể được sử dụng như một công cụ sàng lọc chung.Nó cũng đắt hơn các kỹ thuật khác, ít cụ thể hơn và có thể không có sẵn trong tất cả các phòng thí nghiệm hoặc bệnh viện./P. Những ưu điểm và nhược điểm của huỳnh quang trong lai tạo tại chỗ được mô tả tốt nhất bằng ví dụ.Cá được sử dụng thường xuyên trong chẩn đoán ung thư vú để xác định xem bệnh nhân có nhiều bản sao của gen gọi là HER2 hay không.Điều này thường chỉ ra một dạng ung thư vú tích cực hơn và bệnh nhân nên nhận được một số loại thuốc như một phần của điều trị.Cá có thể được sử dụng cho điều này bởi vì trình tự cặp cơ sở và vị trí nhiễm sắc thể của gen HER2 được biết đến.Ngược lại, cá không thể được sử dụng để xác định gen hoặc gen chưa biết nào đã gây ra ung thư vú hoặc sàng lọc ung thư vú nói chung.