Ano ang fluorescent sa situ hybridization technique?

Ang fluorescent sa situ hybridization, na kilala rin bilang fluorescence sa lugar ng pag -hybrid, ay mas madalas na tinutukoy bilang isda.Ito ay isang pamamaraan na nagsasangkot ng paggamit ng isang maikling strand ng DNA na may label na may isang fluorescent dye upang makita ang mga genetic abnormalities.Pinapayagan ng mga isda ang mga investigator na mailarawan ang mga kromosom, mga bahagi ng chromosom, o mga tiyak na gene nang mabilis at tumpak.Ito ay madalas na ginagamit upang matukoy ang pagbabala ng at paggamot para sa ilang mga sakit, lalo na ang mga cancer.

Ang isda ay ginagamit upang matukoy kung ang mga kromosom ay may mga abnormalidad.Maaaring kabilang dito ang mga pagtanggal ng chromosomal, muling pagbubuo, o mga pagsasalin, kung saan ang dalawang chromosome ay may mga segment na lumipat.Pinapayagan din ng isda ang mga investigator na mailarawan ang mga tiyak na gen.Maaari itong matukoy kung ang isang tiyak na gene ay naroroon, kung saan matatagpuan ito sa mga kromosom, at kung maraming mga kopya ang naroroon.Ito ay tinatawag na Gene Mapping.

Ang genetic makeup ng isang tao ay nakapaloob sa kanilang DNA, na matatagpuan sa nuclei ng lahat ng kanilang mga cell.Ang DNA ay may dalawang strands na komplimentaryong sa bawat isa.Sa madaling salita, mayroon silang mga molekula na tinatawag na mga pares ng base na magkakasamang tumutugma nang eksakto.Ang mga gene ay mga segment ng DNA na may isang partikular na pagkakasunud -sunod ng mga pares ng base at matatagpuan sa mga tiyak na lugar ng chromosome.Ang mga gene ay minana at matukoy kung paano gumagana ang mga cell, ngunit maaari rin silang maging mutated kung ang pagkakasunud -sunod ng mga pagbabago sa mga pares ng base ng DNA.

Ang fluorescent sa situ hybridization technique ay nagsasamantala sa komplimentaryong kalikasan ng mga strands ng DNA.Ang mga investigator ay unang lumikha ng isang pagsisiyasat.Ito ay isang maikling, solong strand ng DNA na komplimentaryong sa pagkakasunud -sunod ng genetic na hinahanap ng investigator.Ang pagsisiyasat ay pagkatapos ay may label o nakakabit sa isang fluorescent dye.Ang sample ay pinainit upang ma -denature ang DNA sa nuclei ng mga cell.Nangangahulugan ito na ang dobleng strands ng DNA sa mga sample cells ay naghiwalay upang mabuo ang mga solong strands.Ang isang tiyak na pagsisiyasat ng isda ay pagkatapos ay na -hybridize sa sample.Sa madaling salita, ang nag -iisang strand ng pagsisiyasat ay ipinakilala at nag -fuse kasama ang komplimentaryong solong strand sa mga denatured sample cells.

Gamit ang isang espesyal na fluorescent mikroskopyo, tinitingnan ng mananaliksik ang sample.Kung ang tiyak na gene o chromosome ay naroroon sa mga sample cells, lilitaw ito bilang isang ilaw na ilaw laban sa isang mas madidilim na background.Madaling makita ng mga mananaliksik kung ang gene ay naroroon o hindi, at kung ito ay, kung gaano karaming mga kopya ng gene ang nasa bawat cell.Kung hinahanap ng mananaliksik ang lokasyon ng isang gene, makikita niya kung nasaan ito sa chromosome.Ang isang regular na light mikroskopyo ay hindi maaaring magamit sa mga isda, dahil ang fluorescent dye ay nagbibigay ng napakababang antas ng ilaw.

Ang paggamit ng DNA hybridization na may mga probes ay unang nagawa noong 1960;Gayunpaman, ang mga probes ay may label na may mga radioactive na sangkap kaysa sa mga fluorescent.Maraming problema ito.Ang mga radioactive na sangkap ay likas na hindi matatag, mapanganib, at nangangailangan ng mga espesyal na protocol para sa pagtatapon.Tumatagal din ito ng mahabang panahon upang masukat ang radioactive signal na inilabas ng hybridized probe.Ang fluorescent sa situ hybridization technique ay nagtagumpay sa karamihan ng mga hadlang na ito.

Kung alam ng mga investigator kung anong gene ang kanilang hinahanap, ang isda ay mabilis at tumpak sa paghahanap nito.Maaari ring isagawa ang mga isda kahit na ang mga cell ay hindi aktibong naghahati, at nagbibigay ito ng mas tiyak na impormasyon tungkol sa mga abnormalidad sa mga kromosom.Higit pang mga maginoo na pamamaraan, tulad ng karotyping, ay sinasabi lamang sa mga investigator ang bilang at laki ng mga kromosom sa loob ng isang cell.

Ang fluorescent sa situ hybridization ay may mga kawalan.Dahil ang susi sa isda ay alam ang pagkakasunud -sunod ng pares ng base at/o lokasyon ng isang gene, hindi ito magagamit bilang isang tool sa pangkalahatang screening.Mas mahal din ito kaysa sa iba pa, hindi gaanong tiyak na mga pamamaraan at maaaring hindi magagamit sa lahat ng mga laboratoryo o ospital./p.

Ang mga pakinabang at kawalan ng fluorescent sa lugar ng pag -hybrid ay pinakamahusay na inilarawan ng halimbawa.Ang mga isda ay regular na ginagamit sa diagnosis ng kanser sa suso upang matukoy kung ang isang pasyente ay may maraming mga kopya ng isang gene na tinatawag na HER2.Ito ay karaniwang nagpapahiwatig ng isang mas agresibong anyo ng kanser sa suso, at ang pasyente ay dapat makatanggap ng ilang mga gamot bilang bahagi ng kanilang paggamot.Ang mga isda ay maaaring magamit para dito dahil ang pagkakasunud -sunod ng pares ng base at lokasyon ng chromosomal ng HER2 gene ay kilala.Sa kaibahan, ang mga isda ay hindi maaaring magamit upang matukoy kung ano ang hindi kilalang gene o genes na sanhi ng kanser sa suso, o upang mag -screen para sa kanser sa suso sa pangkalahatan.