Ποια είναι τα βήματα στη διαδικασία ELISA;

Η διαδικασία ELISA αρχίζει στην κλινική, με ένα δείγμα αίματος που λαμβάνεται από τον ασθενή.Στη συνέχεια ακολουθούνται ορισμένα βήματα χρησιμοποιώντας το κιτ δοκιμής ELISA στο εργαστήριο.Η δοκιμή θα ανιχνεύσει την παρουσία αντισωμάτων ή αντιγόνων σε μια ασθένεια, όπως ο ιός HIV, στο αίμα.Τα βήματα περιλαμβάνουν την προσθήκη διαφόρων ουσιών και πλύσης και τα αποτελέσματα γενικά μετριούνται με μια αλλαγή χρώματος.

Η ενζυμική ανοσοπροσροφητική δοκιμασία (ELISA), η οποία επίσης αναφέρεται ως ενζυμική ανοσοδοκιμασία (ΕΙΑ), χρησιμοποιείται ως διαγνωστική εξέταση.Είναι πολύ γνωστό ως διαγνωστικό τεστ για τον ιό HIV.Η πλάκα δοκιμής αποτελείται συνήθως από 96 μικρά πηγάδια στα οποία ακινητοποιείται ένα συγκεκριμένο αντιγόνο.Εάν το αντίσωμα υπάρχει στο δείγμα ορού, θα δεσμεύεται με το αντιγόνο, επιτρέποντας την ανίχνευση μέσω των διαφόρων βημάτων της διαδικασίας ELISA.

Το πρώτο βήμα στη διαδικασία ELISA είναι να ληφθεί δείγμα από τον ασθενή.Αυτό γίνεται από μια νοσοκόμα, υπό αποστειρωμένες συνθήκες.Το αίμα συνήθως λαμβάνεται από μια φλέβα στο χέρι ή στο χέρι.Ένα tourniquet τοποθετείται στο χέρι για να διογκωθεί η φλέβα και να διευκολύνει τη διαδικασία και το δέρμα καθαρίζεται όπου θα εισαχθεί η βελόνα.Ένα μικρό τσίμπημα μπορεί να γίνει αισθητό καθώς η βελόνα μπαίνει και το αίμα θα συλλεχθεί σε έναν αποστειρωμένο σωλήνα.τεχνικός.Το δείγμα αίματος προστίθεται για πρώτη φορά στα πηγάδια της πλάκας ELISA.Εάν υπάρχει το συγκεκριμένο αντίσωμα, δεσμεύεται με το αντιγόνο.Στη συνέχεια, η πλάκα πλένεται, χρησιμοποιώντας ένα ρυθμιστικό διάλυμα, για να αφαιρέσετε μη δεσμευμένα αντισώματα.

Ένα δεύτερο αντίσωμα, κανονικά της ζωικής προέλευσης, το οποίο έχει ένα ένζυμο που συνδέεται με αυτό, στη συνέχεια προστίθεται, το οποίο θα δεσμεύεται με το σύμπλεγμα αντισώματος-αντιγόνου.Η πλάκα πλένεται και πάλι, για να αφαιρέσετε την περίσσεια.Το ένζυμο είναι αντιδραστικό με το χρώμα όταν ένα υπόστρωμα προστίθεται στο τέλος της διαδικασίας ELISA.Είναι η μέτρηση του βαθμού αλλαγής χρώματος που δίνει το αποτέλεσμα.Στις περισσότερες πλάκες ELISA περιλαμβάνεται ένας θετικός και αρνητικός έλεγχος, για να ελαχιστοποιηθεί τέτοια ψευδή αποτελέσματα.Κατά τη δοκιμή για τον ιό HIV, ένα θετικό αποτέλεσμα θα ακολουθείται συνήθως από μια δεύτερη, επιβεβαιωτική, δοκιμή, συχνά διαφορετικού τύπου, όπως ένα στύπωμα Western.