Ano ang mga hakbang sa pamamaraan ng ELISA?

Ang pamamaraan ng ELISA ay nagsisimula sa klinika, na may isang sample ng dugo na kinuha mula sa pasyente.Ang isang bilang ng mga hakbang ay sinusunod gamit ang ELISA test kit sa laboratoryo.Ang pagsubok ay makakakita ng pagkakaroon ng mga antibodies o antigens sa isang sakit, tulad ng HIV, sa dugo.Kasama sa mga hakbang ang pagdaragdag ng iba't ibang mga sangkap at paghuhugas at mga resulta ay karaniwang sinusukat ng isang pagbabago ng kulay..Ito ay pinaka -kilala bilang isang diagnostic test para sa HIV.Ang test plate ay karaniwang binubuo ng 96 maliit na balon na kung saan ang isang tiyak na antigen ay hindi na -immobilized.Kung ang antibody ay naroroon sa sample ng suwero, magbubuklod ito sa antigen, na nagpapahintulot sa pagtuklas sa pamamagitan ng iba't ibang mga hakbang ng pamamaraan ng ELISA.

Ang unang hakbang sa pamamaraan ng ELISA ay upang makakuha ng isang sample mula sa pasyente.Ginagawa ito ng isang nars, sa ilalim ng mga kundisyon ng sterile.Ang dugo ay karaniwang kinukuha mula sa isang ugat sa braso o kamay.Ang isang tourniquet ay inilalagay sa braso upang bumulwak ang ugat at gawing mas madali ang pamamaraan at nalinis ang balat kung saan ipapasok ang karayom.Ang isang maliit na prick ay maaaring madama habang pumapasok ang karayom at ang dugo ay makokolekta sa isang sterile tube.Technician.Ang sample ng dugo ay unang idinagdag sa mga balon ng plato ng ELISA.Kung ang tiyak na antibody ay naroroon, nagbubuklod ito sa antigen.Ang plato ay pagkatapos ay hugasan, gamit ang isang buffer, upang alisin ang mga walang batayang antibodies.

Ang isang pangalawang antibody, na karaniwang nagmula sa hayop, na mayroong isang enzyme na nakakabit dito, ay idinagdag, na magbubuklod sa antibody-antigen complex.Ang plato ay muling hugasan, upang alisin ang labis.Ang enzyme ay kulay-reaktibo kapag ang isang substrate ay idinagdag sa dulo ng pamamaraan ng ELISA.Ito ay ang pagsukat ng antas ng pagbabago ng kulay na nagbibigay ng resulta.

Ang pamamaraan ng ELISA ay kailangang sundin nang mabuti upang maiwasan ang mga maling resulta.Sa karamihan ng mga plato ng ELISA isang positibo at negatibong kontrol ay kasama, upang mabawasan ang mga maling resulta.Kapag ang pagsubok para sa HIV, ang isang positibong resulta ay karaniwang susundan ng isang segundo, kumpirmasyon, pagsubok, madalas ng ibang uri, tulad ng isang Western blot.