Các bước trong thủ tục ELISA là gì?

Thủ tục ELISA bắt đầu trong phòng khám, với một mẫu máu được lấy từ bệnh nhân.Một số bước sau đó được theo sau bằng cách sử dụng bộ thử nghiệm ELISA trong phòng thí nghiệm.Xét nghiệm sẽ phát hiện sự hiện diện của kháng thể hoặc kháng nguyên với bệnh, chẳng hạn như HIV, trong máu.Các bước bao gồm việc bổ sung các chất và kết quả và kết quả khác nhau được đo bằng thay đổi màu..Nó được biết đến nhiều nhất như là một xét nghiệm chẩn đoán cho HIV.Tấm thử thường bao gồm 96 giếng nhỏ trong đó một kháng nguyên cụ thể được cố định.Nếu kháng thể có trong mẫu huyết thanh, nó sẽ liên kết với kháng nguyên, cho phép phát hiện thông qua các bước khác nhau của quy trình ELISA. Bước đầu tiên trong quy trình ELISA là lấy mẫu từ bệnh nhân.Điều này được thực hiện bởi một y tá, trong điều kiện vô trùng.Máu thường được lấy từ tĩnh mạch trong cánh tay hoặc tay.Một tourniquet được đặt trên cánh tay để sưng tĩnh mạch và làm cho thủ thuật dễ dàng hơn và da được làm sạch nơi kim sẽ được chèn vào.Một cái chích nhỏ có thể được cảm nhận khi kim chảy vào và máu sẽ được thu thập trong ống vô trùng.kỹ thuật viên.Mẫu máu trước tiên được thêm vào các giếng của tấm ELISA.Nếu các kháng thể cụ thể có mặt, nó liên kết với kháng nguyên.Tấm sau đó được rửa sạch, sử dụng bộ đệm, để loại bỏ các kháng thể không liên kết.Một kháng thể thứ hai, thông thường có nguồn gốc động vật, có enzyme được gắn vào nó, sau đó được thêm vào, sẽ liên kết với phức hợp kháng thể-kháng nguyên.Các tấm được rửa một lần nữa, để loại bỏ dư thừa.Enzyme là phản ứng màu khi một chất nền được thêm vào cuối thủ tục ELISA.Đó là phép đo mức độ thay đổi màu sắc cho kết quả. Thủ tục ELISA cần được tuân thủ cẩn thận để tránh kết quả sai.Trong hầu hết các tấm ELISA, một điều khiển tích cực và tiêu cực được bao gồm, để giảm thiểu kết quả sai như vậy.Khi xét nghiệm HIV, kết quả dương tính thường sẽ được theo dõi bởi một lần thứ hai, xác nhận, xét nghiệm, thường thuộc một loại khác, chẳng hạn như Western blot.