Apa langkah -langkah dalam prosedur ELISA?

Prosedur ELISA dimulai di klinik, dengan sampel darah diambil dari pasien.Sejumlah langkah kemudian diikuti menggunakan ELISA Test Kit di laboratorium.Tes akan mendeteksi adanya antibodi atau antigen terhadap penyakit, seperti HIV, dalam darah.Langkah-langkah tersebut meliputi penambahan berbagai zat dan pencucian dan hasil umumnya diukur dengan perubahan warna.

Uji immunosorbent terkait enzim (ELISA), yang juga disebut sebagai enzim immunoassay (EIA), digunakan sebagai uji diagnostik.Ini paling dikenal sebagai tes diagnostik untuk HIV.Piring uji biasanya terdiri dari 96 sumur kecil di mana antigen spesifik diimobilisasi.Jika antibodi ada dalam sampel serum, itu akan mengikat antigen, memungkinkan deteksi melalui berbagai langkah prosedur ELISA.

Langkah pertama dalam prosedur ELISA adalah untuk mendapatkan sampel dari pasien.Ini dilakukan oleh seorang perawat, dalam kondisi steril.Darah biasanya diambil dari vena di lengan atau tangan.Turniquet ditempatkan di lengan untuk membengkak vena dan membuat prosedur lebih mudah dan kulit dibersihkan di mana jarum akan dimasukkan.Tusukan kecil mungkin dirasakan saat jarum masuk dan darah akan dikumpulkan dalam tabung steril.

setelah sampel darah diambil, dipindahkan ke laboratorium di mana sisa prosedur ELISA akan dilakukan oleh labTeknisi.Sampel darah pertama kali ditambahkan ke sumur pelat ELISA.Jika ada antibodi spesifik, ia berikatan dengan antigen.Piring kemudian dicuci, menggunakan buffer, untuk menghilangkan antibodi yang tidak terikat.

Antibodi kedua, biasanya berasal dari hewan, yang memiliki enzim yang melekat padanya, kemudian ditambahkan, yang akan mengikat ke kompleks antibodi-antigen.Piring sekali lagi dicuci, untuk menghilangkan kelebihan.Enzim adalah reaktif warna ketika substrat ditambahkan pada akhir prosedur ELISA.Ini adalah pengukuran tingkat perubahan warna yang memberikan hasilnya.

Prosedur ELISA perlu diikuti dengan cermat untuk menghindari hasil yang salah.Di sebagian besar pelat ELISA, kontrol positif dan negatif dimasukkan, untuk meminimalkan hasil yang salah tersebut.Saat pengujian untuk HIV, hasil positif biasanya akan ditindaklanjuti dengan tes kedua, konfirmasi, seringkali dari jenis yang berbeda, seperti Western blot.