Ποιος είναι ο σκοπός της απομάκρυνσης της ενδοτοξίνης;

Η ενδοτοξίνη είναι μια κοινή μολυσματική ουσία ιατρικών προϊόντων που προέρχεται από βακτήρια.Η παρουσία ενδοτοξίνης μπορεί να προέρχεται από εγγενή συστατικά της διαδικασίας κατασκευής ή από τυχαία μόλυνση του προϊόντος.Η ενδοτοξίνη μπορεί να προκαλέσει ενδοτοξική mDash;ή Septic Mdash;σοκ, τραυματισμό ιστών και ακόμη και θάνατος.Η απομάκρυνση της ενδοτοξίνης πριν από την έγκριση του φαρμάκου για απελευθέρωση είναι επομένως απαραίτητη για να αποφευχθεί η πρόκληση ασθένειας στον αποδέκτη ενός φαρμάκου.διαδικασία κατασκευής.Με τα βακτήρια που χωρίζονται γενικά σε δύο ομάδες, το Gram αρνητικό και το Gram θετικό, τα αρνητικά βακτήρια Gram είναι εξαιρετικά κοινά.Η αρνητική ονομασία Gram προέρχεται από την εμφάνιση των βακτηρίων μετά από μια συγκεκριμένη διαδικασία χρώσης, που ονομάζεται λεκές Gram, έχει εκτελεστεί.Η ενδοτοξίνη υπάρχει σε όλα τα αρνητικά βακτήρια Gram, ανεξάρτητα από το αν προκαλούν ασθένεια.

Το εξωτερικό τμήμα ενός αρνητικού βακτηρίου Gram περιέχει λιποπολυσακχαρίτες (LPS) που χρησιμοποιούνται για τη δομική σταθερότητα.Η ενδοτοξίνη αναφέρεται σε αυτό το τμήμα LPS του βακτηρίου.Για παράδειγμα, ένα κύτταρο Ε. Coli περιέχει περίπου 2 εκατομμύρια μόρια LPS.Το LPS δεν υπάρχει μόνο στα κύτταρα των ζωντανών ή νεκρών βακτηρίων, αλλά επίσης απελευθερώνονται συνεχώς στο περιβάλλον.Η απελευθέρωση συμβαίνει κατά τη διάρκεια της ανάπτυξης και της διαίρεσης του βακτηρίου και όταν το κύτταρο πεθαίνει.

Το μόριο LPS έχει έμμεσα επιβλαβή επίδραση στο σώμα.Η ενδοτοξίνη αλληλεπιδρά με το ανοσοποιητικό σύστημα μέσω δέσμευσης με κύτταρα στο αίμα που ονομάζονται μακροφάγα και μονοκύτταρα.Αυτή η δέσμευση προκαλεί φλεγμονώδη απόκριση με απελευθέρωση παραγόντων όπως η ιντερλευκίνη-6, η ιντερλευκίνη-1 και ο παράγοντας νέκρωσης όγκου.Αυτή η φλεγμονώδη απόκριση οδηγεί σε πυρετό και, μερικές φορές, ενδοτοξικό σοκ και θάνατο

Αυτές οι επικίνδυνες επιδράσεις εμφανίζονται είτε με μία μόνο υψηλή δόση ενδοτοξίνης είτε με επαναλαμβανόμενα χαμηλότερα επίπεδα έκθεσης.Μια δόση 1 νανογράμματος LPS ανά χιλιοστόλιτρο προϊόντος μπορεί να επικαλεστεί μια ενδοτοξική αντίδραση σε θηλαστικά όταν το προϊόν εγχέεται ενδοφλεβίως.Τα άτομα με ασθένειες όπως το AIDS, η λευχαιμία ή ο διαβήτης διατρέχουν ιδιαίτερα κίνδυνο για ενδοτοξικό σοκ.

Γενετικά τροποποιημένα Gram αρνητικά βακτήρια χρησιμοποιούνται τακτικά στην παραγωγή βιολογικά δραστικών πρωτεϊνών και πεπτιδίων.Η παρουσία των μορίων LPS τόσο στα κύτταρα παραγωγής όσο και στην γύρω καλλιέργεια σημαίνει ότι το προϊόν απαιτεί καθαρισμό και απομάκρυνση ενδοτοξίνης.Ο λιποπολυσακχαρίτης είναι ένα πολύ σταθερό μόριο σε σύγκριση με τις πρωτεΐνες, αντισταθμίζοντας το ακραίο ρΗ και τις θερμοκρασίες, οπότε η απομάκρυνση της ενδοτοξίνης απαιτεί πολύπλοκες τεχνικές απομάκρυνσης.Οι κατασκευαστές, επομένως, χρησιμοποιούν μέθοδοι όπως χρωματογραφία ανταλλαγής ιόντων, υπερδιήθηση και χρωματογραφία με βάση τη μεμβράνη για απομάκρυνση ενδοτοξίνης ή μείωση σε αποδεκτό επίπεδο.