Apa tujuan penghapusan endotoksin?

Endotoksin adalah kontaminan umum dari produk medis yang berasal dari bakteri.Kehadiran endotoksin dapat berasal dari komponen intrinsik dari proses pembuatan atau dari kontaminasi produk yang tidak disengaja.Endotoksin dapat menyebabkan endotoksik mdash;atau septik mdash;syok, cedera jaringan dan bahkan kematian.Oleh karena itu, penghapusan endotoksin sebelum menyetujui obat untuk dilepaskan oleh karena itu diperlukan untuk menghindari menyebabkan penyakit pada penerima obat.

Kontaminasi endotoksin terjadi ketika kelompok bakteri tertentu, yang disebut bakteri negatif Gram, hadir, atau telah ada, dalam dalamproses pembuatan.Dengan bakteri yang umumnya dibagi menjadi dua kelompok, gram negatif dan gram positif, bakteri gram negatif sangat umum.Penunjukan negatif Gram berasal dari penampilan bakteri setelah proses pewarnaan tertentu, yang disebut pewarnaan gram, telah dilakukan.Endotoksin hadir di semua bakteri negatif gram, terlepas dari apakah mereka menyebabkan penyakit.

Bagian luar bakteri negatif gram mengandung lipopolysaccharides (LPS) yang digunakan untuk stabilitas struktural.Endotoksin mengacu pada bagian LPS ini dari bakteri.Misalnya, sel E. coli berisi sekitar 2 juta molekul LPS.LPS tidak hanya ada dalam sel bakteri hidup atau mati, tetapi juga terus dilepaskan ke lingkungan.Pelepasan terjadi selama pertumbuhan dan pembagian bakteri dan ketika sel mati.

Molekul LPS memiliki efek yang tidak langsung merusak tubuh.Endotoksin berinteraksi dengan sistem kekebalan tubuh melalui pengikatan dengan sel -sel dalam darah yang disebut makrofag dan monosit.Ikatan ini menyebabkan respons inflamasi dengan melepaskan faktor-faktor seperti interleukin-6, interleukin-1 dan faktor nekrosis tumor.Respons inflamasi ini menyebabkan demam dan, kadang -kadang, syok endotoksik dan kematian.

Efek berbahaya ini terjadi baik dengan satu dosis tinggi endotoksin atau dengan tingkat paparan yang lebih rendah berulang.Dosis 1 nanogram LPS per mililiter produk dapat memohon reaksi endotoksik pada mamalia ketika produk disuntikkan secara intravena.Orang dengan penyakit seperti AIDS, leukemia atau diabetes terutama berisiko terkena syok endotoksik.

Bakteri Gram negatif yang direkayasa secara genetik secara teratur digunakan dalam produksi protein dan peptida yang aktif secara biologis.Kehadiran molekul LPS di kedua sel penghasil dan kultur sekitarnya berarti produk membutuhkan pemurnian dan penghapusan endotoksin.Lipopolysaccharide adalah molekul yang sangat stabil dibandingkan dengan protein, menahan pH ekstrem dan suhu, sehingga penghilangan endotoksin memerlukan teknik penghapusan yang kompleks.Produsen, oleh karena itu, menggunakan metode seperti kromatografi pertukaran ion, ultrafiltrasi dan kromatografi berbasis membran untuk penghapusan endotoksin atau pengurangan ke tingkat yang dapat diterima.