Mi az a génkönyvtár?

A génkönyvtár az a deoxiribonukleinsav (DNS) fragmensek gyűjteményének kifejezése, amelyeket véletlenszerűen klónoztak az organizmusok genomjaiból.Plazmidként klónozzák őket, amelyek külön -külön replikálódnak a kromoszómáiktól és a fágoktól, amelyek parazita vírus, amely a baktériumokat táplálja.Plazmidokként klónozva, a gyűjtemény a gazdasejtekből származik, és mindegyik sejt tartalmaz DNS -fragmentumot.A fággénkönyvtárak az úgynevezett fáglizátumokból állnak, amelyek a megsemmisített sejtek maradékaival vannak behelyezve.Amikor a génkönyvtárak tartalmazzák a szervezetről szóló összes genetikai információt, akkor reprezentációs génkönyvtárnak tekintik őket.A rekombináns vektorok CRNA génkönyvtárnak nevezik.A génkönyvtár szűrése olyan sejteket talál, amelyek olyan klónozó vektorokat tartalmaznak, amelyeknek egy adott génet egy génkönyvtárban keresnek, majd az izolálás és betakarítás sok technikájának egyikét használják.A betakarítás után a sejteket klónozzák.Annak érdekében, hogy ésszerű esélye legyen egy adott gén izolálására és klónozására, általában csak a reprezentációs génkönyvtárakat használják, mint minden gén, és egy adott genom minden eredeti DNS -fragmentumát összegyűjtik.A klónozáshoz szükséges emberi gén megkeresésének 99% -os esélyének elérése érdekében több mint 600 000 klónozott sejtet kell szűrni, hogy megtalálják a kívánt gént egy reprezentációs génkönyvtárból.-A könyvtár úgy van felépítve, hogy szervezze a DNS -t és annak több ezer génjét.A könyvtár tízezrek baktériumkolóniák gyűjteményévé válik, amelyek mindegyike a szervezetből származó DNS -fragmentummal modulálódik, amely különleges érdeklődésre számot tartó gént tartalmaz.A könyvtárak restrikciós enzimeket és plazmidot is tartalmaznak.A restrikciós enzimeket a DNS nukleotidinformációinak olvasására használják, és a DNS fragmensekké vágják a nukleotidok egymástól való elválasztásával.

Ugyanazok a restrikciós enzimek vágják le a baktériumok plazmidjait, és a fragmenseket és a plazmidokat egy kémcsőben kombinálják, hogy új kombinációt készítsenek.Ezeket a rekombináns plazmidokat ezután visszatérnek a baktériumtenyészetbe hő sokkkal vagy elektroporációval.Ezeket a lépéseket újra és újra végrehajtják, amíg az eredeti DNS -extrakció összes fragmenséből egy adott genom -organizmus teljes génkönyvtárát nem alakítják ki.