Thư viện gen là gì?

Một thư viện gen là thuật ngữ cho các bộ sưu tập các đoạn axit deoxyribonucleic (DNA) đã được nhân bản ngẫu nhiên từ bộ gen của các sinh vật.Chúng được nhân bản thành plasmid có thể sao chép tách biệt với nhiễm sắc thể và phage của chúng, đó là một loại virus ký sinh ăn vi khuẩn.Khi được nhân bản như plasmid, bộ sưu tập là của các tế bào chủ và mỗi tế bào chứa một đoạn DNA.Các thư viện gen phage được tạo thành từ những gì được gọi là lysates phage, là dư lượng của các tế bào bị phá hủy với một đoạn DNA được chèn vào.Khi các thư viện gen chứa một tập hợp tất cả các thông tin di truyền trên một sinh vật, chúng được coi là thư viện gen đại diện. Ngoài ra, các thư viện có thể sử dụng axit nucleic tái tổ hợp tế bào (RNA) cho vật liệu brothing và bộ sưu tập tế bào chủ này vớiCác vectơ tái tổ hợp được gọi là thư viện gen CRNA.Sàng lọc thư viện gen tìm thấy các tế bào cụ thể có chứa các vectơ nhân bản với một gen cụ thể đang được tìm kiếm trong thư viện gen và sau đó sử dụng một trong nhiều kỹ thuật cách ly và thu hoạch chúng.Sau khi được thu hoạch, các tế bào được coi là nhân bản.Để có cơ hội hợp lý để cô lập và nhân bản một gen cụ thể, thường chỉ các thư viện gen biểu diễn được sử dụng như mọi gen và mọi đoạn DNA gốc của một bộ gen cụ thể được thu thập ở đó.Để đạt được 99% cơ hội định vị một gen người cụ thể để nhân bản, hơn 600.000 tế bào nhân bản sẽ cần được sàng lọc để tìm gen mong muốn từ thư viện gen đại diện..Thư viện được cấu trúc để tổ chức DNA và hàng ngàn gen khác nhau.Thư viện trở thành một tập hợp hàng chục ngàn khuẩn lạc vi khuẩn, mỗi loại được điều chế với một đoạn DNA từ sinh vật có chứa một gen quan tâm đặc biệt.Thư viện cũng chứa các enzyme hạn chế và plasmid.Các enzyme hạn chế được sử dụng để đọc thông tin nucleotide của DNA và được sử dụng để cắt DNA thành các mảnh bằng cách tách các nucleotide với nhau.Các enzyme hạn chế tương tự đã cắt các plasmid vi khuẩn và các mảnh và plasmid được kết hợp trong một ống nghiệm để kết hợp, tạo ra sự kết hợp mới.Các plasmid tái tổ hợp này sau đó được đưa trở lại nuôi cấy vi khuẩn bằng cách sử dụng sốc nhiệt hoặc điện di.Các bước này được thực hiện nhiều lần cho đến khi toàn bộ thư viện gen được hình thành cho một sinh vật bộ gen cụ thể từ tất cả các đoạn của trích xuất DNA ban đầu.