Skip to main content

Ano ang isang library ng gene?

Ang isang library ng gene ay ang termino para sa mga koleksyon ng deoxyribonucleic acid (DNA) na mga fragment na na -clone nang random mula sa mga genom ng mga organismo.Ang mga ito ay naka -clone bilang mga plasmids na maaaring magkahiwalay mula sa kanilang mga chromosome at phages, na kung saan ay isang parasito na virus na kumakain sa bakterya.Kapag na -clone bilang plasmids ang koleksyon ay ng mga host cells at ang bawat isa sa mga cell ay naglalaman ng isang fragment ng DNA.Ang mga aklatan ng gene ng phage ay binubuo ng tinatawag na phage lysates, na nalalabi ng mga nawasak na mga cell na may isang fragment ng DNA.Kapag ang mga aklatan ng gene ay naglalaman ng isang koleksyon ng lahat ng mga genetic na impormasyon sa isang organismo, itinuturing silang isang representasyon ng gene library.Ang mga recombinant vectors ay kilala bilang isang library ng gene ng CRNA.Ang screening ng library ng Gene ay nakakahanap ng mga partikular na cell na naglalaman ng mga cloning vectors na may isang partikular na gene na hinahangad sa isang library ng gene at pagkatapos ay gumagamit ng isa sa maraming mga pamamaraan ng paghiwalay at pag -aani ng mga ito.Kapag na -ani, ang mga cell ay itinuturing na naka -clone.Upang magkaroon ng isang makatwirang pagkakataon ng paghiwalay at pag -clone ng isang partikular na gene, kadalasan lamang ang mga aklatan ng representasyon ng gene ay ginagamit bilang bawat gene at bawat orihinal na fragment ng DNA ng isang partikular na genome ay nakolekta doon.Upang maabot ang isang 99% na pagkakataon na maghanap ng isang partikular na gene ng tao para sa pag -clone, higit sa 600,000 na mga clon na cell ay kailangang mai -screen upang mahanap ang nais na gene mula sa isang representasyon ng gene library.

Ang DNA ay nakuha mula sa isang organismo upang magsimula sa isang library ng gene.Ang aklatan ay nakabalangkas upang ayusin ang DNA at libu -libong iba't ibang mga gene.Ang aklatan ay nagiging isang koleksyon ng mga sampu -sampung libong mga kolonya ng bakterya, ang bawat isa ay na -modulate na may isang fragment ng DNA mula sa organismo na naglalaman ng isang gene ng espesyal na interes.Naglalaman din ang mga aklatan ng paghihigpit ng mga enzyme at isang plasmid.Ang mga paghihigpit na mga enzyme ay ginagamit upang mabasa ang impormasyon ng nucleotide ng DNA at ginagamit upang i -cut ang DNA sa mga fragment sa pamamagitan ng paghihiwalay ng mga nucleotide sa bawat isa.

Ang parehong paghihigpit ng mga enzymes ay pinutol ang mga bakterya na plasmids at ang mga fragment at plasmids ay pinagsama sa isang test tube upang pagsamahin, na gumagawa ng isang bagong kumbinasyon.Ang mga recombinant plasmids na ito ay pagkatapos ay ibabalik sa kultura ng bakterya gamit ang alinman sa heat shock o electroporation.Ang mga hakbang na ito ay isinasagawa nang paulit -ulit hanggang sa isang buong library ng gene ay nabuo para sa isang partikular na genome organismo mula sa lahat ng mga fragment ng orihinal na pagkuha ng DNA.