Apa metode kjeldahl?

Ilmuwan menggunakan metode Kjeldahl untuk menganalisis persentase nitrogen organik dalam suatu zat.Kadar nitrogen kemudian dapat digunakan untuk menentukan jumlah protein.Nama lengkap dari metode ini adalah metode kjeldahl dari analisis nitrogen mdash;Kadang -kadang analisis protein digunakan sebagai pengganti analisis nitrogen, tetapi istilah -istilahnya merujuk pada metode yang sama.

Kimiawan Johan Kjeldahl pertama kali mempresentasikan metodenya kepada Masyarakat Kimia Denmark pada tahun 1883. Dia menentukan bahwa, karena nitrogen adalah elemen utama dalam protein,Analisis nitrogen dapat digunakan untuk menentukan jumlah protein dalam suatu zat.Temuannya telah ditingkatkan sejak saat itu, tetapi metode dasar tetap ada.

Metode Kjeldahl terdiri dari tiga langkah, biasanya disebut pencernaan, distilasi, dan titrasi.Pencernaan memecah nitrogen menjadi amonia dan distilasi memisahkan amonia dari komponen lain.Jumlah amonia dihitung menggunakan titrasi, maka jumlah nitrogen dan protein dapat dihitung berdasarkan jumlah amonia.

Selama langkah pencernaan, sampel kecil zat yang akan dianalisis dicampur dengan asam sulfat, kalium sulfat, dan katalis yang mempercepat reaksi.Campuran ini dipanaskan hingga suhu yang sangat tinggi mdash;hingga 750 deg; f (sekitar 400 deg; c) mdash;Selama sekitar satu jam, lalu didinginkan.Reaksi yang terjadi dalam campuran yang dipanaskan memecah molekul besar menjadi komponen yang lebih kecil, termasuk ion amonium.

Langkah distilasi mengubah ion amonium menjadi gas amonia dengan menambahkan natrium hidroksida ke dalam campuran.Kemudian suhu larutan dinaikkan, mengubah amonia menjadi gas yang mudah menguap yang naik dalam uap.Uap terperangkap dalam larutan, seperti asam klorida atau asam borat.

amonia yang terperangkap dalam asam menetralkan beberapa asam, yang berarti bahwa ia menurunkan pH.Jumlah asam yang tersisa setelah netralisasi ini dititrasi dengan basa, seperti natrium hidroksida.Pewarna ditambahkan ke larutan asam dan amonia, yang berubah warna saat pH berubah.Kemudian sejumlah kecil basa ditambahkan ke asam hanya sampai larutan berubah warna.Jumlah basis yang diperlukan untuk mencapai titik akhir ini dapat digunakan untuk menghitung jumlah amonia dalam larutan asli.

untuk menghitung jumlah nitrogen, seorang ilmuwan harus terlebih dahulu mengetahui jumlah mol asam dan basa yang ada di dalamsolusi akhir.Mengurangi mol basa dari mol asam memberikan mol amonia.Mol amonia dalam larutan akhir sama dengan mol nitrogen, sehingga angka ini dikalikan dengan 14 mdash;massa atom nitrogen mdash;untuk menemukan gram nitrogen.Nitrogen persen ditemukan dengan membagi gram nitrogen dengan total gram dalam sampel asli dan mengalikan dengan 100. Persentase protein metode kjeldahl ditemukan dengan mengalikan persen nitrogen dengan faktor konversi.Faktor konversi ini biasanya 6,25, dengan pengecualian beberapa zat seperti produk gandum dan susu.