Phương pháp Kjeldahl là gì?

Các nhà khoa học sử dụng phương pháp Kjeldahl để phân tích phần trăm nitơ hữu cơ trong một chất.Mức nitơ sau đó có thể được sử dụng để xác định lượng protein.Tên đầy đủ của phương pháp là phương pháp phân tích nitơ Kjeldahl mdash;Đôi khi phân tích protein được sử dụng thay cho phân tích nitơ, nhưng các thuật ngữ đề cập đến cùng một phương pháp.Phân tích nitơ có thể được sử dụng để xác định lượng protein trong một chất.Những phát hiện của ông đã được cải thiện kể từ thời điểm đó, nhưng phương pháp cơ bản vẫn được đặt ra. Phương pháp Kjeldahl bao gồm ba bước, thường được gọi là tiêu hóa, chưng cất và chuẩn độ.Tiêu hóa phá vỡ nitơ thành amoniac và chưng cất tách amoniac với các thành phần khác.Lượng amoniac được tính bằng cách sử dụng chuẩn độ, sau đó lượng nitơ và protein có thể được tính toán dựa trên lượng amoniac.và một chất xúc tác tăng tốc phản ứng.Hỗn hợp này được làm nóng đến nhiệt độ rất cao mdash;lên đến 750 deg; f (khoảng 400 deg; c) mdash;Trong khoảng một giờ, sau đó làm mát.Các phản ứng diễn ra trong hỗn hợp nóng chia các phân tử lớn thành các thành phần nhỏ hơn, bao gồm các ion amoni.

Bước chưng cất chuyển đổi các ion amoni thành khí amoniac bằng cách thêm natri hydroxit vào hỗn hợp.Sau đó, nhiệt độ của dung dịch được nâng lên, chuyển amoniac thành một loại khí dễ bay hơi tăng trong hơi.Hơi được giữ lại trong một dung dịch, chẳng hạn như axit clohydric hoặc axit boric.

amoniac bị mắc kẹt trong một axit trung hòa một số axit, có nghĩa là nó làm giảm độ pH.Lượng axit còn lại sau khi trung hòa này được chuẩn độ với một cơ sở, chẳng hạn như natri hydroxit.Một thuốc nhuộm được thêm vào dung dịch axit và amoniac, thay đổi màu sắc khi pH thay đổi.Sau đó, một lượng nhỏ của cơ sở được thêm vào axit chỉ cho đến khi dung dịch thay đổi màu.Lượng cơ sở cần thiết để đạt đến điểm cuối này có thể được sử dụng để tính toán lượng amoniac trong dung dịch ban đầu. Để tính toán lượng nitơ, trước tiên một nhà khoa học phải biết số mol axit và cơ sở có mặt tronggiải pháp cuối cùng.Trừ các mol của bazơ từ các mol axit cho các mol amoniac.Các mol amoniac trong dung dịch cuối cùng giống như các mol nitơ, vì vậy con số này được nhân với 14 mdash;Khối lượng nguyên tử của nitơ mdash;Để tìm gram của nitơ.Phần trăm nitơ được tìm thấy bằng cách chia gram nitơ cho tổng gam trong mẫu ban đầu và nhân với 100. Phần trăm protein Phương pháp Kjeldahl được tìm thấy bằng cách nhân phần trăm nitơ với yếu tố chuyển đổi.Hệ số chuyển đổi này thường là 6,25, ngoại trừ một vài chất như lúa mì và các sản phẩm sữa.