Ano ang ELISA Protocol?

Ang isang enzyme na nauugnay sa immunosorbent assay (ELISA) ay isang pangkaraniwang pagsubok na ginagamit sa immunology upang makita ang mga antigens o antibodies.Ang mga antigens ay nag -uudyok ng isang reaksyon ng immune system at mdash;Sa madaling salita, nagdudulot sila ng mga karamdaman.Ginagamit ang ELISA upang makita ang maraming mga antigens ng bakterya at viral, kabilang ang virus ng immunodeficiency ng tao (HIV), malaria, cholera, tigdas, at mga bukol.Ang isang bahagyang magkakaibang ELISA protocol ay maaaring magamit upang makita ang mga antibodies sa mga ito at maraming iba pang mga pathogen.Ang isang protocol ng ELISA ay ang hakbang-hakbang na pamamaraan para sa pagsasagawa ng isang tiyak na ELISA.

Kahit na ang ELISA protocol ay nag-iiba nang bahagya, depende sa uri ng ELISA na isinasagawa, ang pangunahing konsepto ay pareho para sa lahat ng mga ito.Ang ELISA ay nakasalalay sa mga antibodies na nauugnay sa enzyme, na tinatawag ding antiglobulins .Ang isang molekula ng signal na nakakabit sa mga antiglobulin na ito ay nagdudulot ng isang substrate na idinagdag sa panahon ng assay na baguhin ang kulay, kung ang nais na antigen o antibody ay naroroon.Ang halaga ng antigen o antibody na naroroon ay proporsyonal sa dami ng pagbabago ng kulay, na maaaring masukat sa isang electronic plate reader.

Mayroong tatlong pangunahing uri ng ELISA.Ang isang direktang ELISA ay karaniwang ginagamit upang makita ang mga antigens kaysa sa mga antibodies.Ito ang pinakasimpleng protocol ng ELISA, dahil ang antibody na nauugnay sa enzyme ay nagbubuklod nang direkta sa nais na antigen.Ang substrate ay pagkatapos ay idinagdag upang matukoy ang dami ng antigen na naroroon.Tinatawag na isang sandwich

Elisa Mdash;maaaring magamit upang makita ang mga antigens.Ang isang protocol ng Sandwich ELISA ay nangangailangan ng dalawang antibodies, na tinatawag na Capture and Detection Antibodies, upang magbigkis sa nais na antigen.Ang isang antiglobulin ay idinagdag, na nagbubuklod sa antibody ng pagtuklas, at idinagdag ang substrate.Ang hindi tuwirang ELISA ay sumusunod sa isang katulad na protocol, ngunit gumagamit ng isang capture antigen sa halip na isang capture antibody upang makita ang nais na antibody.sensitibong assay.Kabaligtaran sa iba pang mga protocol ng ELISA, ang mapagkumpitensya na ELISA ay gumagamit ng isang antigen na nauugnay sa enzyme sa halip na isang antibody, at isang bahagyang magkakaibang pamamaraan ng dami.Sa loob nito, ang halimbawang naglalaman ng antigen na makikita at ang antigen na nauugnay sa enzyme ay parehong idinagdag sa isang antibody, at ang dalawang antigens ay nakikipagkumpitensya para sa mga site na nagbubuklod ng antibody.Kapag idinagdag ang substrate, ang pagbabago ng kulay ay mas malaki, na may mas mataas na ratio ng nakatali na mga antigens na nauugnay sa enzyme upang nakatali ang mga sample antigens.Nangangahulugan ito na ang mas mataas na pagbabago ng kulay ay napansin sa mas mababang konsentrasyon ng sample antigen, na kung ano ang ginagawang sensitibo sa pamamaraang ito.