Tinh chế peptide là gì?

Peptide là các polyme nhỏ bao gồm các axit amin.Nhiều người hoạt động sinh học như hormone, độc tố hoặc có các khả năng khác.Các hợp chất như vậy thường được sử dụng trong nghiên cứu sinh học, y tế và hóa học.Chúng cũng đóng vai trò là khối xây dựng protein khi số lượng trong số chúng được liên kết với nhau.Tinh chế peptide là một kỹ thuật được sử dụng để tinh chế một lượng lớn peptide mong muốn hoặc để giúp tách các peptide được tạo ra khỏi quá trình tiêu hóa protein.khác biệt với một ma trận vật lý.Sắc ký chất lỏng áp suất cao (HPLC) thường được sử dụng để tinh chế peptide.Các peptide hoặc peptide được áp dụng trong hỗn hợp các dung môi thay đổi theo thời gian khi chúng được bơm qua một cột của các hạt nhỏ ở áp suất cao.Các peptide khác nhau ẩn dật tại các thời điểm khác nhau và được phát hiện bởi một màn hình, thường là máy quang phổ UV. Khi tiến hành nghiên cứu về các peptide, thường thì chất quan tâm là rất hiếm và không thể mua được từ các công ty hóa học.Nếu cấu trúc của peptide mong muốn được biết đến, việc chuẩn bị hóa học thường dễ dàng hơn bằng cách tổng hợp peptide hơn là cách ly hợp chất khỏi các nguồn tự nhiên.Sản phẩm tự nhiên cô lập nổi tiếng là khó khăn.Các peptide tổng hợp thường được tinh chế bởi HPLC. Tổng hợp hóa học như vậy có thể gây khó khăn cho một nhà nghiên cứu độc lập không phải là một nhà hóa học.Thông thường, nhiệm vụ này được ký hợp đồng với các công ty tổng hợp peptide chuyên về các kỹ thuật này.Điều này có thể kinh tế hơn so với cố gắng thiết lập hệ thống từ đầu trong phòng thí nghiệm.Các công ty peptide có thể làm cho các peptide tùy chỉnh phù hợp với nhu cầu của nhà nghiên cứu. Một lý do khác để tinh chế peptide có thể là khi một nhà nghiên cứu đã tinh chế protein và đang cố gắng xác định danh tính của nó.Anh ta hoặc cô ta có thể làm suy giảm protein thành các mảnh peptide, tách các mảnh bằng cách tinh chế và có mô hình phân mảnh của các peptide được phát hiện bởi máy quang phổ khối khi chúng rửa giải từ cột.Kỹ thuật này được gọi là LC-MS, viết tắt của phép đo sắc ký khối lỏng.Nó cung cấp cho trọng lượng phân tử và thành phần axit amin của các mảnh và thường cho phép xác định protein, nếu các loại tương tự hoặc giống hệt nhau đã được xác định trước đây. Nhiều nhà nghiên cứu làm việc với các peptide có các đặc điểm mớiHãy thử và tìm những người có hoạt động sinh học bất thường.Có một toàn bộ lĩnh vực gọi là peptidomimetic dành cho nghiên cứu về các peptide mới lạ như vậy.Thông thường, các chuỗi do máy tính tạo ra được thiết kế và một thư viện peptide được tổng hợp bao gồm một loạt các peptide không điển hình.Tinh chế peptide được sử dụng để tách các thành viên riêng lẻ của thư viện này để cung cấp peptide thuần túy để kiểm tra hoạt động sinh học.Chiến lược này đã thành công trong việc tạo ra ít nhất một loại thuốc mới có sẵn về mặt thương mại. Nhiều peptide hoạt động sinh học được quan tâm cho việc sử dụng y tế.Các hợp chất được sử dụng thương mại, chẳng hạn như insulin, thường được sản xuất bởi các hệ thống biểu hiện quá mức DNA tái tổ hợp tạo ra một lượng lớn hợp chất mong muốn.Thông thường, các peptide được biến đổi gen để tạo điều kiện cho việc tinh chế bằng cách có một số loại thẻ được thêm vào mặt trận của chúng.Điều này cho phép sử dụng sắc ký ái lực để tinh chế peptide.Với loại sắc ký này, thẻ là một hợp chất, chẳng hạn như histidine, sẽ liên kết một ma trận hạt, như niken, được chọn vì khả năng liên kết thẻ.Protein không mong muốn và peptide thường đi qua cột mà không liên kết.Các peptide được thiết kế đặc biệt thường liên kết mạnh mẽ với cột.Sau khi các protein và peptide gây ô nhiễm đã bị rửa sạch, peptide mong muốn được rửa giải bởi một hợp chất cạnh tranh để liên kết với TAnh ta ma trận.Một người sau đó có một chế phẩm khá thuần khiết của peptide mong muốn và thẻ có thể được loại bỏ bằng cách phân tách.