Hogyan működik a baktérium endotoxin tesztelése?

A baktérium endotoxin tesztelése általában olyan reagensek alkalmazását foglalja magában, amelyek egy esetleges szennyező anyaggal történő oldatban keverve reakciót okoznak, jelezve az endotoxin jelenlétét.A kromogén tesztelés, a gélrög -teszt és a turbidimetrikus tesztek azok a módszerek, amelyeket a tudósok általában alkalmaznak a bakteriális endotoxin -teszteléshez.A technikusok ezeket az értékelési módszereket különféle anyagokra és tárgyakra használják, amikor ellenőrzik az endotoxin -szennyeződést.A víznek, a gyógyszerek, berendezések és csomagoláshoz felhasznált nyersanyagoknak mind az endotoxin szabványoknak kell átadniuk.

A baktériumok, a gombák és a vírusok mind védekező külső membránokkal rendelkeznek, amelyek lipopoliszacharidokból állnak, és LP -knek is nevezik.Ezen láncok lipid része endotoxinokat tartalmaz.Ezek az anyagok általában a membránon belül maradnak, de a sejtosztódás során és a sejtek pusztulása vagy lízise során szabadulnak fel.Az emberekben ezek az anyagok lázot, rendellenes koagulációt, szeptikus sokkot és egyéb tüneteket okoznak, bár a sejtben az exotoxinokkal ellentétben az endotoxinok nem alakulnak át toxoidmá.Általában a mikrobiológusok ellenőrzik-e a különféle gram-negatív baktériumokhoz kapcsolódó endotoxinok jelenlétét, ideértve az e-t is.coli .

A gélrög-teszt, vagy a limulus ameboecyte lizátum (LAL) vizsgálat magában foglalja a patkó-rák amoebocytáiból származó membránpusztító kémia alkalmazását, amelyet Limulus Polyphemus-nak is neveznek.vagy a gélelés akkor fordul elő, amikor a lizátumot a szóban forgó tárgynak vagy anyagnak teszik ki.A mikrobiológusok általában ezt a baktérium endotoxin -tesztelésének ezt a módszert használják a meggyőző eredmények kromogén és turbidimetrikus tesztelésével összefüggésben.Amikor ez a lizátum endotoxinnal érintkezik, a reakció specifikus színt eredményez.A végső tesztelési folyamat magában foglalja az oldat zavarosságának vagy felhősségének mérését.A technikusok a gélrög -tesztben képződött oldatot egy spektrofotométerre teszik ki, amely fénysugarat bocsát ki.A fényintenzitás elvesztésének mérésével a gerendában, amikor áthalad az oldaton, a mikrobiológusok meghatározhatják, hogy van -e endotoxin.

A laboratóriumi munkatársak általában befejezik ezt a három baktérium endotoxin -tesztet, hogy a pontos eredmények biztosítása érdekében kétszer vagy háromszor teszteljék.A géltesztet nem kizárólag, mivel a legalacsonyabb detektálási határérték 0,03 ehrlich egység/milliliter (EU/ml).A kromogén és turbidimetrikus tesztek az endotoxinokat detektálják a 0,005 EU/ml tartományban.A biztonsági paraméterek nagymértékben különböznek a vizsgált anyagtól függően.Míg az injekcióhoz vagy öntözéshez használt steril víz legfeljebb 0,25 EU/ml -t tartalmazhat, a steril víz inhalációs célokra akár 0,5 EU/ml -t is tartalmazhat.