Bagaimana cara kerja pengujian endotoksin bakteri?

Pengujian endotoksin bakteri biasanya melibatkan penggunaan reagen yang, ketika dicampur dalam larutan dengan kemungkinan kontaminan, menyebabkan reaksi, menandakan keberadaan endotoksin.Pengujian kromogenik, uji bekuan gel dan pengujian turbidimetri adalah metode yang biasanya digunakan para ilmuwan untuk pengujian endotoksin bakteri.Teknisi menggunakan metode evaluasi ini pada berbagai zat dan objek saat memeriksa kontaminasi endotoksin.Air, bahan baku yang digunakan dalam membuat obat, peralatan, dan kemasan semua harus melewati standar endotoksin.

Bakteri, jamur dan virus semuanya memiliki membran eksterior pelindung yang terdiri dari lipopolysaccharides, juga disebut sebagai LPS.Bagian lipid dari rantai ini mengandung endotoksin.Zat -zat ini umumnya tetap berada di dalam membran tetapi dilepaskan selama proses pembelahan sel dan selama penghancuran seluler atau lisis.Pada manusia, zat -zat ini menyebabkan demam, koagulasi abnormal, syok septik dan gejala lainnya meskipun tidak seperti eksotoksin dalam sel, endotoksin tidak dikonversi menjadi toksoid.Secara umum, ahli mikrobiologi memeriksa keberadaan endotoksin yang terkait dengan berbagai bakteri gram negatif, termasuk E.coli .

Uji bekuan gel, atau uji limulus ameboecyte lysate (lal), melibatkan penggunaan bahan kimia penghancuran membran yang berasal dari amoebosit kepiting tapal kuda, juga disebut limulus polifemus.atau pembuatan gel terjadi ketika lisat terpapar pada objek atau zat yang dimaksud.Ahli mikrobiologi biasanya menggunakan metode pengujian endotoksin bakteri ini dalam hubungannya dengan pengujian kromogenik dan turbidimetri untuk hasil yang konklusif.

endotoksin bakteri kromogenik pengujian endotoksin menggunakan LAL yang dirawat secara khusus.Ketika lisat ini menghubungi endotoksin, reaksi menghasilkan warna tertentu.Proses pengujian akhir mencakup mengukur kekeruhan atau kekeruhan larutan.Teknisi mengekspos larutan yang terbentuk dalam uji gumpalan gel ke spektrofotometer, yang memancarkan sinar cahaya.Dengan mengukur hilangnya intensitas cahaya dalam balok saat melewati larutan, ahli mikrobiologi dapat menentukan apakah ada endotoksin atau tidak.

Associate lab umumnya menyelesaikan tiga tes endotoksin bakteri ini dua atau tiga kali untuk memastikan hasil yang akurat.Tes gel tidak digunakan secara eksklusif karena batas deteksi terendah adalah 0,03 unit Ehrlich per mililiter (EU/mL).Pengujian kromogenik dan turbidimetri mendeteksi endotoksin dalam kisaran 0,005 EU/mL.Parameter keselamatan sangat berbeda tergantung pada zat yang diuji.Sementara air steril yang digunakan untuk tujuan injeksi atau irigasi tidak dapat mengandung tidak lebih dari 0,25 EU/mL, air steril untuk keperluan inhalasi dapat mengandung hingga 0,5 EU/mL.