Làm thế nào để xét nghiệm nội độc tố vi khuẩn hoạt động?

Xét nghiệm endotoxin vi khuẩn thường liên quan đến việc sử dụng thuốc thử, khi trộn trong dung dịch với chất gây ô nhiễm có thể, gây ra phản ứng, biểu thị sự hiện diện của endotoxin.Xét nghiệm nhiễm sắc thể, xét nghiệm cục máu đông gel và thử nghiệm nhiễu loạn là các phương pháp các nhà khoa học thường sử dụng để xét nghiệm nội độc tố vi khuẩn.Kỹ thuật viên sử dụng các phương pháp đánh giá này trên nhiều loại chất và đối tượng khi kiểm tra ô nhiễm nội độc tố.Nước, nguyên liệu thô được sử dụng để chế tạo thuốc, thiết bị và bao bì phải vượt qua các tiêu chuẩn nội độc tố.Vi khuẩn, nấm và virus đều có màng bên ngoài bảo vệ bao gồm lipopolysacarit, còn được gọi là LPS.Phần lipid của các chuỗi này chứa nội độc tố.Những chất này thường ở trong màng nhưng được giải phóng trong quá trình phân chia tế bào và trong quá trình phá hủy tế bào hoặc ly giải.Ở người, các chất này gây sốt, đông máu bất thường, sốc nhiễm trùng và các triệu chứng khác mặc dù không giống như exotoxin trong tế bào, endotoxin không chuyển đổi thành độc tố.Nói chung, các nhà vi trùng học kiểm tra sự hiện diện của nội độc tố liên quan đến các vi khuẩn gram âm khác nhau, bao gồm

e.coli.Thử nghiệm cục máu đông gel, hoặc xét nghiệm Limulus Ameboecyte lysate (LAL), liên quan đến việc sử dụng hóa chất phá hủy màng có nguồn gốc từ các tế bào amoebocytes của cua móng ngựa, còn được gọi là

limulus polyphemus.hoặc gelling xảy ra khi lysate tiếp xúc với đối tượng hoặc chất được đề cập.Các nhà vi sinh thường sử dụng phương pháp xét nghiệm endotoxin vi khuẩn này kết hợp với xét nghiệm nhiễm sắc thể và nhiễu loạn để kết quả kết luận.

xét nghiệm nội độc tố vi khuẩn nhiễm sắc thể sử dụng LAL được xử lý đặc biệt.Khi lysate này tiếp xúc với endotoxin, phản ứng tạo ra một màu cụ thể.Quá trình thử nghiệm cuối cùng bao gồm đo độ đục hoặc độ mây của giải pháp.Các kỹ thuật viên phơi bày dung dịch được hình thành trong thử nghiệm cục máu đông gel với máy quang phổ, phát ra một chùm ánh sáng.Bằng cách đo việc mất cường độ ánh sáng trong chùm khi nó đi qua dung dịch, các nhà vi sinh có thể xác định liệu có hay không một endotoxin có hay không.Các cộng sự trong phòng thí nghiệm thường hoàn thành ba xét nghiệm endotoxin vi khuẩn này hai hoặc ba lần để đảm bảo kết quả chính xác.Thử nghiệm gel không được sử dụng độc quyền vì giới hạn phát hiện thấp nhất của nó là 0,03 đơn vị Ehrlich trên mỗi ml (EU/mL).Xét nghiệm nhiễm sắc thể và nhiễu loạn phát hiện nội độc tố trong phạm vi 0,005 EU/mL.Các thông số an toàn khác nhau rất nhiều tùy thuộc vào chất được kiểm tra.Mặc dù nước vô trùng được sử dụng cho mục đích tiêm hoặc tưới có thể chứa không quá 0,25 EU/mL, nước vô trùng cho mục đích hít phải có thể chứa tới 0,5 EU/mL.