Paano gumagana ang pagsubok sa endotoxin ng bakterya?

Ang pagsubok sa endotoxin ng bakterya ay karaniwang nagsasangkot ng paggamit ng mga reagents na, kapag halo -halong sa isang solusyon na may isang posibleng kontaminasyon, ay nagdudulot ng isang reaksyon, na nagpapahiwatig ng pagkakaroon ng isang endotoxin.Ang pagsubok sa Chromogenic, ang pagsubok ng gel clot at pagsubok ng turbidimetric ay ang mga pamamaraan na karaniwang ginagamit ng mga siyentipiko para sa pagsubok ng endotoxin ng bakterya.Ginagamit ng mga technician ang mga pamamaraang ito ng pagsusuri sa iba't ibang mga sangkap at bagay kapag sinusuri ang kontaminasyon ng endotoxin.Tubig, ang mga hilaw na materyales na ginamit sa paggawa ng mga gamot, kagamitan at packaging ay dapat na pumasa sa mga pamantayan ng endotoxin.

Ang bakterya, fungi at mga virus lahat ay may proteksiyon na mga panlabas na lamad na binubuo ng lipopolysaccharides, na tinutukoy din bilang LPS.Ang bahagi ng lipid ng mga kadena na ito ay naglalaman ng mga endotoxins.Ang mga sangkap na ito ay karaniwang nananatili sa loob ng lamad ngunit pinakawalan sa panahon ng proseso ng cell division at sa panahon ng pagkasira ng cellular o lysis.Sa mga tao, ang mga sangkap na ito ay nagdudulot ng lagnat, hindi normal na coagulation, septic shock at iba pang mga sintomas kahit na hindi katulad ng mga exotoxins sa loob ng cell, ang mga endotoxins ay hindi nag -convert sa isang lason.Kadalasan, sinusuri ng mga microbiologist ang pagkakaroon ng mga endotoxins na nauugnay sa iba't ibang mga bakterya na negatibong gramo, kabilang ang e.coli .

Ang gel clot test, o limulus ameboecyte lysate (LAL) assay, ay nagsasangkot ng paggamit ng isang lamad na sumisira sa kemikal na nagmula sa amoebocytes ng horseshoe crab, na tinutukoy din bilang limulus polyphemus.o naganap ang gelling kapag ang lysate ay nakalantad sa bagay o sangkap na pinag -uusapan.Karaniwang ginagamit ng mga microbiologist ang pamamaraang ito ng pagsubok sa endotoxin ng bakterya kasabay ng pagsubok ng chromogenic at turbidimetric para sa mga konklusyon na resulta.Kapag ang lysate na ito ay nakikipag -ugnay sa isang endotoxin, ang reaksyon ay gumagawa ng isang tiyak na kulay.Ang pangwakas na proseso ng pagsubok ay kasama ang pagsukat ng kaguluhan o ulap ng solusyon.Ang mga tekniko ay naglalantad ng solusyon na nabuo sa pagsubok ng gel clot sa isang spectrophotometer, na nagpapalabas ng isang sinag ng ilaw.Sa pamamagitan ng pagsukat ng pagkawala ng light intensity sa beam habang dumadaan ito sa solusyon, ang mga microbiologist ay maaaring matukoy kung naroroon o hindi isang endotoxin.

Ang mga kasama sa Lab ay karaniwang nakumpleto ang tatlong bacterial endotoxin na pagsubok ng dalawa o tatlong beses upang matiyak ang tumpak na mga resulta.Ang pagsubok ng gel ay hindi ginagamit ng eksklusibo dahil ang pinakamababang limitasyon ng pagtuklas ay 0.03 Ehrlich unit bawat milliliter (EU/mL).Ang Chromogenic at Turbidimetric na pagsubok ay nakakakita ng mga endotoxins sa 0.005 EU/mL range.Ang mga parameter ng kaligtasan ay naiiba nang malaki depende sa sangkap na nasubok.Habang ang sterile water na ginagamit para sa mga layunin ng iniksyon o patubig ay maaaring maglaman ng hindi hihigit sa 0.25 EU/mL, ang sterile water para sa mga layunin ng paglanghap ay maaaring maglaman ng hanggang sa 0.5 EU/mL.