Mi az északi blot?

Az északi blot hibridizáció egy olyan módszer, amelyet a mintában szereplő messenger RNS (mRNS) szintek kimutatására és a jelen lévő mRNS mennyiségének számszerűsítésére használnak.Noha más erősebb technikák léteznek, az Northern Blot továbbra is a standard annak egyszerűsége és könnyű használatának köszönhetően.Az északi blot -technika lehetővé teszi a több minta közvetlen összehasonlítását egyetlen kísérletben.

A Messenger RNS egy olyan nukleinsav típusa, amelyet egy gén expresszálásakor állítanak elő.A sejtben bekapcsolt és funkcionális gént átírják az mRNS -be.Az mRNS -t ezután a sejt citoplazmájába szállítják, ahol fehérjévé alakul.A sejtek mRNS mintájának északi blot elemzése ezért hasznos információkat nyújthat a sejt előállított fehérjék tömbjéről.a méret szerint kell elválasztani.Az ismert méretű mRNS molekulák mintáit egyszerre futtatják, hogy kontrollot biztosítsanak.Miután az elektroforézis befejeződött, a mintákat áthelyezzük és immobilizálják egy szilárd membránon, általában olyan anyagból, mint a nylonból.A mintákat ezután az elemzés előtt néhány órán keresztül radioaktívan jelölt szondáknak teszik ki.Az elemzés során a radioaktív jelölt szondara hibridizált mRNS egyértelműen kimutatható röntgen segítségével.

Az északi blot -technika lehetővé teszi a génexpressziós minták megfigyelését a különböző szövettípusok között.Összehasonlítható a különféle szövetek és szervtípusok sejtjeiből kivont messenger RNS, és megvizsgálható a stresszre, a fertőzésre és a többi ingerekre adott sejtválaszok.Az mRNS expressziójának különböző körülmények közötti különbségeinek megvizsgálásával a tudós meghatározhatja, hogy milyen típusú fehérjék termelnek bizonyos ingerekre válaszul.Ez nyomokat adhat az ismeretlen fehérjék funkcióiról, vagy az ismert fehérjék esetében, a szóban forgó ingerekre adott celluláris válaszokról.

Például egy északi blot megmutathatja, hogy egy ismeretlen fehérje expressziója növekszik egy adott toxin jelenlétére adott válaszként.Elméletileg elmélete lehet, hogy a protein részt vesz a toxicitás csökkentésében, talán a kémia kiszállításával a sejtből vagy metabolitvá alakítva.Ha az ismert fehérjéket vizsgálják, a fehérje expressziójának változásainak dokumentálása információt nyújthat magáról a válaszról.Ha például egy ismert molekuláris transzporter expressziója növekszik, akkor megerősíthető, hogy a toxinra adott celluláris válasz a toxint a sejtből történő kiszállítására szolgál.